目的:克隆人血管紧张素转换酶2(ACE2)基因,构建其真核表达载体并将之转染入体外培养的人血管内皮细胞中.方法:采用PCR方法从人胎儿心脏cDNA文库扩增出人ACE2 cDNA全长基因,克隆到pcDNA3.1-D/V5-His表达载体上,构建重组真核表达质粒phACE2,经酶切和测序鉴定.采用脂质体法将phACE2转染至人血管内皮细胞中,分别利用实时定量PCR和Western印迹检测重组ACE2的mRNA和蛋白的表达情况.结果:经PCR、酶切和基因序列测定证实重组入载体的片段(2419 bp)为目的基因序列,在转染的内皮细胞中发现ACE2的mRNA和蛋白的表达明显增加(P＜0.01).结论:本研究成功构建并表达了pcDNA3.1-hACE2重组真核表达载体,为该基因在高血压病防治中的功效研究奠定了基础.
作者：钟久昌；余细勇；于汇民；林秋雄；周志凌；杨敏
来源：心血管康复医学杂志 2007 年 16卷 4期
