您的账号已在其他设备登录,您当前账号已强迫下线,
如非您本人操作,建议您在会员中心进行密码修改

确定
收藏 | 浏览131 | 下载104

目的 观察微小RNA-205(miR-205)对前列腺癌细胞PC3迁移能力以及靶基因E盒结合锌指蛋白1(ZEB1)表达的影响.方法 采用实时定量PCR检测各前列腺癌细胞株(PC3、LNCaP、DU145)和良性前列腺上皮细胞(PrEC)中 miR-205的mRNA相对表达量,通过miR-205模拟物(miR-205 mimics)、miR-205抑制物(miR-205 inhibitor)和相应的空载体分别转染前列腺癌细胞株PC3后,将PC3细胞分为过表达miR-205组、mimics对照组、抑制miR-205组和inhibitor对照组4组,利用细胞划痕试验和Transwell细胞侵袭试验检测各组细胞迁移和侵袭能力.采用蛋白免疫印迹法检测过表达miR-205组、mimics对照组细胞ZEB1的蛋白表达水平,并通过荧光素酶报告试验验证miR-205与ZEB1基因的直接调控关系.利用蛋白免疫印迹法检测过表达miR-205组、mimics对照组细胞的上皮钙黏素和波形蛋白表达水平.结果 前列腺癌细胞DU145、LNCaP和PC3的miR-205 mRNA相对表达量均低于良性前列腺上皮细胞PrEC(P均<0.01);PC3的miR-205 mRNA相对表达量最低,选为进一步试验的细胞株.24 h后,划痕试验显示过表达miR-205组的迁移细胞数少于mimics对照组,抑制miR-205组的迁移细胞数多于inhibitor对照组(P均<0.01);Transwell细胞侵袭试验显示,过表达miR-205组侵袭细胞数少于mimics对照组,抑制mi

作者:方少伟;叶永康;李牧;梁镇锋;卢世隆;吴永定;林卓远;罗正;韩兆冬

来源:新医学 2017 年 48卷 8期

知识库介绍

临床诊疗知识库该平台旨在解决临床医护人员在学习、工作中对医学信息的需求,方便快速、便捷的获取实用的医学信息,辅助临床决策参考。该库包含疾病、药品、检查、指南规范、病例文献及循证文献等多种丰富权威的临床资源。

详细介绍
热门关注
免责声明:本知识库提供的有关内容等信息仅供学习参考,不代替医生的诊断和医嘱。

收藏
| 浏览:131 | 下载:104
作者:
方少伟;叶永康;李牧;梁镇锋;卢世隆;吴永定;林卓远;罗正;韩兆冬
来源:
新医学 2017 年 48卷 8期
标签:
微小RNA-205 前列腺癌 细胞迁移 E盒结合锌指蛋白1 上皮-间质转化 MicroRNA-205 Prostate cancer Cell migration Zinc finger E-box-binding homeobox 1 Epithelial-mesenchymal transition
目的 观察微小RNA-205(miR-205)对前列腺癌细胞PC3迁移能力以及靶基因E盒结合锌指蛋白1(ZEB1)表达的影响.方法 采用实时定量PCR检测各前列腺癌细胞株(PC3、LNCaP、DU145)和良性前列腺上皮细胞(PrEC)中 miR-205的mRNA相对表达量,通过miR-205模拟物(miR-205 mimics)、miR-205抑制物(miR-205 inhibitor)和相应的空载体分别转染前列腺癌细胞株PC3后,将PC3细胞分为过表达miR-205组、mimics对照组、抑制miR-205组和inhibitor对照组4组,利用细胞划痕试验和Transwell细胞侵袭试验检测各组细胞迁移和侵袭能力.采用蛋白免疫印迹法检测过表达miR-205组、mimics对照组细胞ZEB1的蛋白表达水平,并通过荧光素酶报告试验验证miR-205与ZEB1基因的直接调控关系.利用蛋白免疫印迹法检测过表达miR-205组、mimics对照组细胞的上皮钙黏素和波形蛋白表达水平.结果 前列腺癌细胞DU145、LNCaP和PC3的miR-205 mRNA相对表达量均低于良性前列腺上皮细胞PrEC(P均<0.01);PC3的miR-205 mRNA相对表达量最低,选为进一步试验的细胞株.24 h后,划痕试验显示过表达miR-205组的迁移细胞数少于mimics对照组,抑制miR-205组的迁移细胞数多于inhibitor对照组(P均<0.01);Transwell细胞侵袭试验显示,过表达miR-205组侵袭细胞数少于mimics对照组,抑制mi