氯吡格雷是一种广泛用于预防静脉血栓形成的抗血小板药物.研究表明,携带有CYP2C19基因功能缺失型等位基因CYP2C19*2、CYP2C19*3的病人,其体内代谢氯吡格雷成为其活性形式的能力降低,导致氯吡格雷抑制血小板聚集功能减弱.文章旨在建立一种利用高分辨率熔解曲线分析(High-resolution melting curve analysis,HRM)技术在闭合单管中同时对CYP2C19*2、CYP2C19*3两个多态性位点进行简便、准确分型的方法.本实验针对两个SNP位点分别设计特异性的HRM引物,并在两个位点引物的5'端分别加上富含AT和GC的序列,保证两个位点的扩增产物熔解峰无重叠.利用HRM技术,快速、灵敏地对64例随机DNA样本的CYP2C19*2、CYP2C19*3两个多态性位点进行了基因分型,且HRM方法的分型结果与测序验证结果完全一致.因此,利用HRM技术可以实现在闭合单管中简便、准确地对CYP2C19*2、CYP2C19*3两个多态性位点同时进行基因分型.该方法有望应用于临床,指导氯吡格雷的个体化用药.
作者:曹春鸽;孙海燕;周芳芳;王诗铭;陈红岩;卢大儒
来源:遗传 2013 年 35卷 7期