目的 探讨高糖以及糖基化终末产物(advanced glycationend products,AGEs)对体外培养的视网膜Müller细胞低氧诱导因子(hypoxia-inducible factor,HIF)-1α介导缺氧信号通路的影响.方法 采用改进的酶消化法培养新生5-7 dSD大鼠视网膜Müller细胞,纯化培养至第2代后,以2×106 mL-1密度接种于48孔培养板中,根据培养液中葡萄糖及AGEs含量不同,分为正常组、模拟高糖组(葡萄糖终浓度为50 mmol·L-1)、低AGEs及高AGEs组(培养液AGEs终浓度分别为50 mg·L-1、100 mg·L-1),每组设6个复孔,干预48 h后,以ELISA法测定细胞培养上清液中HIF-1α、血管内皮生长因子(vascular endothe-lial growth factor,VEGF)蛋白表达量以及脯氨酸羟化酶(proline hydroxylase domain,PHD)1、2、3的活性;以RT-PCR测定Müller细胞HIF-1αmRNA及VEGF mRNA相对内参的表达量.结果 高AGEs组HIF-1α蛋白表达量为(3.248±0.404) μg·L-1,明显高于正常组的(2.577±0.158) μg·L-1及高糖组的(2.600 ±0.131) μg·L-1,差异均有统计学意义(均为P<0.05);低AGEs组HIF-1α mRNA相对表达量为3.205±0.865,明显高于高糖组的2.438±0.444及高AGEs组的1.935±0.191,差异均有统计学意义(均为P<0.05);正常组VEGF蛋白含量和VEGF mRNA的相对表达量分别为(
作者:宋明霞;谢学军;万李;方杨;张梅
来源:眼科新进展 2013 年 33卷 12期