目的:探讨蛋白酶体抑制剂MG132联合顺铂对肺癌NCI-H1299细胞凋亡及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-8(Caspase-8)蛋白表达的影响。方法将肺癌NCI-H1299细胞行体外原代及传代培养,将培养好的细胞分为4组:对照组(C组,加入磷酸盐缓冲液3 ml)、顺铂组(D组,加入顺铂20 mg/L)、MG132组(M组,加入MG-1322.5μmol/L)、顺铂+MG132组(D+M组,加入顺铂20 mg/L+MG-1322.5μmol/L)。孵育30 min,应用MTT比色检测法测定各组肺癌NCI-H1299细胞生长抑制情况,倒置显微镜观察肺癌细胞形态学的变化,流式细胞仪测定肺癌细胞凋亡情况,应用Western blot法对Caspase-3、Caspase-8蛋白表达进行定性及定量分析。结果 MTT结果显示,M组、D+M组肺癌NCI-H1299细胞增殖率显著高于C组及D组( P <0.05),而D+M组肺癌细胞增殖率高于M组( P >0.05);肺癌NCI-H1299细胞培养48 h后 M组、D+M组细胞凋亡率高于C组及D组(P <0.05),且D+M组肺癌细胞凋亡率高于M组;Western blot法显示M组、D+M组Caspase-3、Caspase-8蛋白表达水平低于C组及D组( P均<0.05)。结论 MG132与顺铂联合应用可抑制TGF-β1诱导肺癌NCI-H1299细胞凋亡,可能作用机制是MG13
作者:万千;方震宇;马南山;杜卓
来源:疑难病杂志 2016 年 15卷 10期