目的::探讨EZH2抑制剂3-deazaneplanocin A(DZNep)对人葡萄膜黑色素瘤细胞增殖的影响。方法::实验研究。先采用Western blot法检测EZH2在正常葡萄膜黑色素细胞(UM95、UM96)和葡萄膜黑色素瘤细胞(M23、SP6.5)中的表达,然后在M23和SP6.5细胞的培养基中加入DZNep进行处理,作为实验组;以溶剂DMSO处理作为阴性对照组。采用MTS、平板克隆形成、EdU实验以及流式细胞术分别检测细胞存活、克隆形成能力、细胞增殖以及细胞周期。Western blot技术检测DZNep对细胞中H3K27me3修饰水平,细胞周期相关蛋白以及ERK信号通路的影响。组间数据均采用独立样本
t检验进行比较。
结果::EZH2在M23和SP6.5细胞中的表达水平与在UM95细胞中的表达相比显著升高(
t=25.050,
P=0.002;
t=14.220,
P=0.005)。MTS结果显示,DZNep显著抑制M23和SP6.5细胞的活性,呈浓度和作用时间依赖性。与阴性对照组相比,实验组中M23和SP6.5细胞的克隆形成数量显著降低(
t=3.364,
P=0.015;
t=6.997,
P<0.001),并且反映细胞增殖的EdU标记细胞比例明显减少(
t=5.117,
P=0.002;
t=3.399,
P=0.015)。流式细胞术检测结果显示,与阴性对照
作者:赵云萍;金珊珊;刘琦;王教;王丽花;闫东升
来源:中华眼视光学与视觉科学杂志 2020 年 22卷 7期