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目的::探讨EZH2抑制剂3-deazaneplanocin A(DZNep)对人葡萄膜黑色素瘤细胞增殖的影响。方法::实验研究。先采用Western blot法检测EZH2在正常葡萄膜黑色素细胞(UM95、UM96)和葡萄膜黑色素瘤细胞(M23、SP6.5)中的表达,然后在M23和SP6.5细胞的培养基中加入DZNep进行处理,作为实验组;以溶剂DMSO处理作为阴性对照组。采用MTS、平板克隆形成、EdU实验以及流式细胞术分别检测细胞存活、克隆形成能力、细胞增殖以及细胞周期。Western blot技术检测DZNep对细胞中H3K27me3修饰水平,细胞周期相关蛋白以及ERK信号通路的影响。组间数据均采用独立样本 t检验进行比较。 结果::EZH2在M23和SP6.5细胞中的表达水平与在UM95细胞中的表达相比显著升高( t=25.050, P=0.002; t=14.220, P=0.005)。MTS结果显示,DZNep显著抑制M23和SP6.5细胞的活性,呈浓度和作用时间依赖性。与阴性对照组相比,实验组中M23和SP6.5细胞的克隆形成数量显著降低( t=3.364, P=0.015; t=6.997, P<0.001),并且反映细胞增殖的EdU标记细胞比例明显减少( t=5.117, P=0.002; t=3.399, P=0.015)。流式细胞术检测结果显示,与阴性对照

作者:赵云萍;金珊珊;刘琦;王教;王丽花;闫东升

来源:中华眼视光学与视觉科学杂志 2020 年 22卷 7期

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作者:
赵云萍;金珊珊;刘琦;王教;王丽花;闫东升
来源:
中华眼视光学与视觉科学杂志 2020 年 22卷 7期
标签:
葡萄膜黑色素瘤 EZH2 3-deazaneplanocin A 细胞增殖 uveal melanoma EZH2 3-deazaneplanocin A cell proliferation
目的::探讨EZH2抑制剂3-deazaneplanocin A(DZNep)对人葡萄膜黑色素瘤细胞增殖的影响。方法::实验研究。先采用Western blot法检测EZH2在正常葡萄膜黑色素细胞(UM95、UM96)和葡萄膜黑色素瘤细胞(M23、SP6.5)中的表达,然后在M23和SP6.5细胞的培养基中加入DZNep进行处理,作为实验组;以溶剂DMSO处理作为阴性对照组。采用MTS、平板克隆形成、EdU实验以及流式细胞术分别检测细胞存活、克隆形成能力、细胞增殖以及细胞周期。Western blot技术检测DZNep对细胞中H3K27me3修饰水平,细胞周期相关蛋白以及ERK信号通路的影响。组间数据均采用独立样本 t检验进行比较。 结果::EZH2在M23和SP6.5细胞中的表达水平与在UM95细胞中的表达相比显著升高( t=25.050, P=0.002; t=14.220, P=0.005)。MTS结果显示,DZNep显著抑制M23和SP6.5细胞的活性,呈浓度和作用时间依赖性。与阴性对照组相比,实验组中M23和SP6.5细胞的克隆形成数量显著降低( t=3.364, P=0.015; t=6.997, P<0.001),并且反映细胞增殖的EdU标记细胞比例明显减少( t=5.117, P=0.002; t=3.399, P=0.015)。流式细胞术检测结果显示,与阴性对照