目的 探讨最适退火温度和核酸扩增(PCR)周期,利用筑巢式PCR检测慢性粒细胞白血病(CML)的bcr-abl融合基因类型,并进行PCR荧光定量(RQ-PCR),研究其与疾病的关系.方法 通过改变PCR条件,将退火温度由55℃增加到60℃,反应周期由原来的30周期增加到45周期,检测14例22份标本.同时用荧光定量试剂检测标本.结果 退火温度为58℃,45周期可测出103copies/μl定量标准品的PCR产物.22份标本bcr-abl融合基因巢式PCR结果均阳性.其中b2a2型9份,b3a2型13份.定量检测18例阳性,量值在102～106copies/μg,两例急变患者急性期和慢性期有明显差异.结论 筑巢式PCR是一种敏感而准确的检测方法,对bcr-abl进行定量有助于反映白血病细胞负荷、评价疗效及判断疾病预后.
作者：肖敏敏；吴祥林；江继发
来源：医学研究杂志 2006 年 35卷 8期
