目的 分析微小RNA-23a(microRNAs-23a,miR-23a)在直肠癌组织及细胞系中的相对表达水平,以及miR-23a对直肠癌细胞增殖和凋亡的作用,并分析其可能作用机制.方法 采用qRT-PCR检测miR-23a在36例直肠癌组织和癌旁正常组织中的表达水平;利用qRT-PCR检测miR-23a在直肠癌SW480细胞及人正常结肠上皮细胞株NCM460中的表达;合成miR-23a抑制剂(inhibitor) RNA片段和抑制剂阴性对照RNA片段(inhibitor negative control,inhibitor NC),并将其分别转染至SW480细胞后,通过CCK-8法检测miR-23a inhibitor转染SW480细胞后对细胞增殖的影响;流式细胞术检测转染后细胞凋亡率;Western blot法检测上皮剪接调节蛋白1(epithelial splicing regulatory protein 1,ESRPl)蛋白在SW480细胞中的表达水平;构建野生型pGL3-ESRP1-3'UTR(wt-pGL3-ESRP1-3'UTR)或突变型pGL3-ESRP1-3'UTR(mut-pGL3-ESRP1-3'UTR)质粒,HEK293和SW480细胞经上述质粒分别与miR-23a inhibitor或inhibitor NC共转染后测定双荧光素酶活性.结果 与癌旁正常组织相比较,miR-23a在直肠癌组织中的相对表达水平明显上调,差异有统计学意义(P=0.000);与NCM460细胞相比较,miR-23a在SW480细胞中的表达量显著上调,差异有统计学意义(P=0.000);SW480细胞转染miR-23a inhibitor后,细
作者:劳玲娟;宋新江;徐佳
来源:医学研究杂志 2017 年 46卷 6期