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目的 探讨宫颈癌Hella细胞中干扰HPV E6对eIF4E表达的调控,探寻HPV E6促癌的新途径,为宫颈癌诊断和治疗提供新靶点.方法 构建高效的靶向HPV18 E6的shRNA质粒(shE6)并测序,而后转染人宫颈癌Hela细胞,荧光显微镜及流式细胞术检测转染效率.而后以Real-time PCR检测E6及eIF4E的mRNA水平,采用CCK-8法检测Hela细胞增殖能力的改变,流式细胞术检测细胞周期.结果 测序结果显示成功构建shE6质粒.shE6-3转染人宫颈癌Hela细胞后48 h,E6及eIF4E mRNA表达的抑制率分别约为80%,76%.shE6-3对Hela细胞的增殖活性在48 h的抑制效果最明显,增殖抑制率约为21%;相对于NC组,shE6组Go/G1期细胞比例显著增高,而S期比例减少,G2/M期未见明显变化.结论 RNA干扰HPV E6能够下调eIF4E转录表达,抑制宫颈癌Hela细胞增殖,并阻滞细胞周期于G0/G1期.eIF4E有望成为宫颈癌防治的潜在靶点.

作者:王森;高敏;赵毅;朱伟;姜恩平;康海仙;姚运红;胡新荣

来源:中国医药导报 2014 年 11卷 2期

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作者:
王森;高敏;赵毅;朱伟;姜恩平;康海仙;姚运红;胡新荣
来源:
中国医药导报 2014 年 11卷 2期
标签:
宫颈癌 E6 真核细胞翻译起始因子 RNA干扰 Cervical cancer E6 Eukaryotic cells and translation initiation RNA interference
目的 探讨宫颈癌Hella细胞中干扰HPV E6对eIF4E表达的调控,探寻HPV E6促癌的新途径,为宫颈癌诊断和治疗提供新靶点.方法 构建高效的靶向HPV18 E6的shRNA质粒(shE6)并测序,而后转染人宫颈癌Hela细胞,荧光显微镜及流式细胞术检测转染效率.而后以Real-time PCR检测E6及eIF4E的mRNA水平,采用CCK-8法检测Hela细胞增殖能力的改变,流式细胞术检测细胞周期.结果 测序结果显示成功构建shE6质粒.shE6-3转染人宫颈癌Hela细胞后48 h,E6及eIF4E mRNA表达的抑制率分别约为80%,76%.shE6-3对Hela细胞的增殖活性在48 h的抑制效果最明显,增殖抑制率约为21%;相对于NC组,shE6组Go/G1期细胞比例显著增高,而S期比例减少,G2/M期未见明显变化.结论 RNA干扰HPV E6能够下调eIF4E转录表达,抑制宫颈癌Hela细胞增殖,并阻滞细胞周期于G0/G1期.eIF4E有望成为宫颈癌防治的潜在靶点.