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目的 评价磁珠核酸提取方法在血浆EB病毒DNA(EBV-DNA)实时荧光定量PCR检测中应用的性能.方法 采用自动化磁珠法提取核酸,并结合实时荧光定量PCR测定EBV-DNA,利用第三方定值参考物质评价该方法的检测性能.同时选取100例鼻咽癌患者,分别用磁珠法与煮沸法定量检测其血浆EBV-DNA,比较分析两种方法的相关性.结果 基于自动化磁珠法的实时荧光定量PCR系统检测EBV-DNA,其低、中、高水平的重复性精密度均<3/5 TEa(TEa=靶值±0.4 lg),中间精密度<4/5 TEa;在5.4×101~5.4×105 U/mL范围内具有良好的线性;最低检测限约为3.334×101 U/mL;样本中Hb干扰物浓度低于8.667 g/L,对磁珠法检测结果无明显影响.磁珠法与煮沸法的检测结果呈线性相关,阴阳性符合率为83%.结论 采用自动化磁珠核酸提取方法结合实时荧光定量PCR检测血浆EBV-DNA,具备良好的检测性能.

作者:郑瑜宏;钟凤金;陈岩松;林莺莺;肖振州;潘建基;林少俊;郭巧娟;陈燕

来源:中国医药导报 2017 年 14卷 24期

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郑瑜宏;钟凤金;陈岩松;林莺莺;肖振州;潘建基;林少俊;郭巧娟;陈燕
来源:
中国医药导报 2017 年 14卷 24期
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磁珠法 EB病毒 核酸 提取 性能 血浆 Magnetic bead method Epstein-Barr virus Nucleic acid Extraction Performance Plasma
目的 评价磁珠核酸提取方法在血浆EB病毒DNA(EBV-DNA)实时荧光定量PCR检测中应用的性能.方法 采用自动化磁珠法提取核酸,并结合实时荧光定量PCR测定EBV-DNA,利用第三方定值参考物质评价该方法的检测性能.同时选取100例鼻咽癌患者,分别用磁珠法与煮沸法定量检测其血浆EBV-DNA,比较分析两种方法的相关性.结果 基于自动化磁珠法的实时荧光定量PCR系统检测EBV-DNA,其低、中、高水平的重复性精密度均<3/5 TEa(TEa=靶值±0.4 lg),中间精密度<4/5 TEa;在5.4×101~5.4×105 U/mL范围内具有良好的线性;最低检测限约为3.334×101 U/mL;样本中Hb干扰物浓度低于8.667 g/L,对磁珠法检测结果无明显影响.磁珠法与煮沸法的检测结果呈线性相关,阴阳性符合率为83%.结论 采用自动化磁珠核酸提取方法结合实时荧光定量PCR检测血浆EBV-DNA,具备良好的检测性能.