目的：观察17β-雌二醇(E2)诱导小牛胸主动脉内皮细胞(BAECs)快速激活并释放一氧化氮(NO)的时间和浓度依赖性趋势。方法采用24孔平底细胞培养板培养 BAECs 分别进行实验,观察不同浓度 E2诱导 BAECs 快速激活并释放 NO 的浓度依赖性趋势及非基因组机制通路。每次实验均重复3次。使用电子自旋共振波谱法定量测定 NO 的释放；蛋白免疫印迹法检测 BAECs 一氧化氮合成酶(eNOS)磷酸化的水平。结果终浓度为100 nmol?L－1的 E2分别处理 BAECs 1,5,10和15 min 后,NO 的释放量呈现时间依赖性,在10 min 达到高峰；培养液中加入不同终浓度的 E2分别处理 BAECs 10 min后,NO 的释放量和 eNOS 的磷酸化均显示有剂量依赖性,并在终浓度为100 nmol?L－1时达到高峰；培养液中分别加入等体积0.9％氯化钠溶液、100 nmol?L－1 E2和25μg?mL－1放线菌素 D(Act-D)处理 BAECs 10 min 后,NO 释放量分别为(5.38±2.35),(10.59±3.28)和(10.68±3.31) nmol?mg－1；eNOS 的磷酸化水平分别为0.36±0.03,0.98±0.08和0.99±0.08；与经0.9％氯化钠溶液处理比较,经100 nmol?L－1 E2处理后,BAECs 的 NO 释放量和 eNOS 的磷酸化水平均显著增加(均 P<0.05)。结论终浓度为100 nmol?L－1 E2可以通过非基因组机制快速激活血管内皮细胞中 eNOS 的

作者：徐元萍；高凌；宋晓晖；周倩

来源：医药导报 2015 年 9期