目的 探讨在脂多糖(LPS)诱导血脑屏障(BBB)破坏中紧密连接Occludin、ZO-1表达的变化以及c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路与基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的作用机制.方法 利用MTT法检测不同浓度LPS以及SP600125(JNK信号通路抑制剂)对人脑微血管内皮细胞(hCMEC/D3)活力的影响.Western blot法检测不同浓度LPS对Occludin、ZO-1蛋白表达的影响.用SP600125阻断JNK信号通路,Western blot法检测LPS诱导的JNK磷酸化水平、Occludin和ZO-1蛋白表达的变化,qRT-PCR法检测Occludin、ZO-1及MMP-9 mRNA表达的变化.用SB-3CT特异性抑制MMP-9活性,Western blot法检测LPS诱导的Occludin蛋白表达的变化.结果 LPS、SP600125浓度分别在10 μg/ml(0.19 ±0.02)和0.22 μg/ml(0.18±0.01)以下时对hCMEC/D3细胞活力无明显影响(P＞0.05).不同浓度LPS(1μg/ml、10 μg/ml、50 μg/ml、100 μg/ml)处理hCMEC/D3后Occludin和ZO-1蛋白的表达量均下降.LPS处理hCMEC/D3后JNK磷酸化水平增高,而抑制JNK磷酸化可以明显上调LPS诱导的Occludin蛋白(0.87±0.03、P＜0.001)及其mRNA(1.00±0.09、P＜0.05)的表达,但对ZO-1蛋白(1.14 ±0.06、P＞0.05)及其mRNA(0.81 ±0.03、P＞0.05)的表达无明显影响.另外,抑制MMP-9的活性可以明显上调Occludin蛋白的表

作者：覃兰惠；黄文；莫雪安；陈艳兰；巫相宏

来源：中风与神经疾病杂志 2015 年 32卷 5期