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背景与目的:小鼠骨肉瘤模型在骨恶性肿瘤的研究中应用较为广泛,良好的活细胞标记方法将有利于研究骨肉瘤的侵袭和转移生物学行为,本研究拟建立稳定表达增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)基因的小鼠骨肉瘤S180细胞株,同时对EGFP-S180细胞进行体内和体外的初步研究.方法:采用电穿孔转染法将EGFP基因导入小鼠骨肉瘤S180细胞,通过G418筛选,建立稳定表达EGFP蛋白的小鼠骨肉瘤EGFP-S180细胞株;激光共聚焦显微镜检测转染前后癌基因c-Myc的表达:建立相应的皮下接种和腹腔接种荷瘤小鼠模型.结果:建立了稳定表达EGFP的EGFP-S180细胞株,转染与未转染细胞的c-Myc表达差异无统计学意义(P>0.05),小鼠皮下接种和腹腔接种成瘤的时间无显著性差异(P>0.05).结论:稳定表达EGFP的S180细胞株没有显著改变肿瘤细胞S180的生物学行为,建立稳定表达EGFP的S180细胞株在体内外研究的方法是可行的,为骨肉瘤体内外的示踪研究提供了实验基础.

作者:杨晓;胡豇

来源:中国癌症杂志 2010 年 20卷 1期

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作者:
杨晓;胡豇
来源:
中国癌症杂志 2010 年 20卷 1期
标签:
增强型绿色荧光蛋白 转染 S180 enhanced green fluorescent protein transfection S180
背景与目的:小鼠骨肉瘤模型在骨恶性肿瘤的研究中应用较为广泛,良好的活细胞标记方法将有利于研究骨肉瘤的侵袭和转移生物学行为,本研究拟建立稳定表达增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)基因的小鼠骨肉瘤S180细胞株,同时对EGFP-S180细胞进行体内和体外的初步研究.方法:采用电穿孔转染法将EGFP基因导入小鼠骨肉瘤S180细胞,通过G418筛选,建立稳定表达EGFP蛋白的小鼠骨肉瘤EGFP-S180细胞株;激光共聚焦显微镜检测转染前后癌基因c-Myc的表达:建立相应的皮下接种和腹腔接种荷瘤小鼠模型.结果:建立了稳定表达EGFP的EGFP-S180细胞株,转染与未转染细胞的c-Myc表达差异无统计学意义(P>0.05),小鼠皮下接种和腹腔接种成瘤的时间无显著性差异(P>0.05).结论:稳定表达EGFP的S180细胞株没有显著改变肿瘤细胞S180的生物学行为,建立稳定表达EGFP的S180细胞株在体内外研究的方法是可行的,为骨肉瘤体内外的示踪研究提供了实验基础.