目的:建立体外定向诱导成人骨髓间质干细胞(MSC)分化为成骨细胞的模型.方法:采用Ficoll-Paque淋巴细胞分离液分离成人MSC,体外扩增,流式细胞仪检测细胞表面抗原的表达,应用地塞米松、β-甘油磷酸钠、vitamin C定向诱导MSC分化为成骨细胞,检测碱性磷酸酶(AP)活性、钙沉积、骨桥蛋白的表达鉴定成骨细胞,比较P3和P10代MSC成骨分化的能力.结果:MSC在体外扩增原代可获得(5-6)×105个细胞,10代可获得2×1010个细胞.流式细胞仪检测结果显示CD29、CD44、CD59、CD105、CD166表达阳性,CD11a、CD14、CD33、CD34、CD45、CD38、CD80、CD86、CD117表达为阴性.加入成骨诱导剂,细胞形态发生变化,AP活性增强,骨桥蛋白表达阳性,钙沉积逐渐出现.P3和P10代的MSC均有良好的分化为成骨细胞的能力.结论:成人骨髓间质干细胞在体外可分化为成骨细胞.
作者:张丽蓉;夏文杰;项鹏;陈振光;张秀明;李艳;李树浓
来源:中国病理生理杂志 2002 年 18卷 7期