目的:用人类端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的反义寡核苷酸(ASODN)抑制Jurkat细胞端粒酶活性后,观察化疗药物(顺铂、柔红霉素、长春新碱、足叶乙甙)对Jurkat细胞凋亡的影响.方法:采用台盼蓝拒染法观察hTERT ASODN与化疗药物(顺铂、柔红霉素、长春新碱、足叶乙甙)联合作用对Jurkat细胞系生长的影响;姬姆萨染色法观察凋亡细胞的形态变化;琼脂糖凝胶电泳分析细胞凋亡的DNA断裂情况;通过流式细胞仪对细胞凋亡峰进行定量分析.结果:hTERTASODN作用于Jurkat细胞24h再加入柔红霉素、长春新碱、足叶乙甙,对细胞生长的抑制分别与单用柔红霉素、长春新碱、足叶乙甙及hTERT正义寡核苷酸(sense oligodeoxynucleotide,SODN)联合柔红霉素、长春新碱、足叶乙甙组相比,无显著差异(P>0.05).hTERT ASODN作用于Jurkat细胞24 h再加入顺铂,分别与SODN联合顺铂作用组、单用顺铂作用组相比,对细胞抑制明显增强(P<0.05).hTERTASODN作用于Jurkat细胞24 h再加入顺铂作用48h,细胞出现典型的凋亡形态学改变,经琼脂糖凝胶电泳即可见到DNA梯形条带,而SODN与顺铂联合作用组及单独应用顺铂均未见到DNA梯形条带.hTERT ASODN与2.5 μmol/L顺铂联合作用于Jurkat细胞48h的凋亡细胞百分率(25.18±3.63)
作者:李文瑜;张洹;何冬梅
来源:中国病理生理杂志 2003 年 19卷 12期