目的:构建小鼠IFN-γ的真核表达载体,将载体在体外转染小鼠腹腔MΦ,观察MΦ的抗肿瘤效应.在荷瘤小鼠腹腔内注射重组表达载体,观察抗肿瘤效应.方法:RT-PCR扩增小鼠IFN-γ mRNA,将扩增的cDNA通过亚克隆重组到表达载体pcDNA3.1上.体外转染小鼠的腹腔MΦ,RT-PCR检测小鼠IFN-γ mRNA的表达,用转染的MΦ的培养上清培养另一组MΦ,MTT法检测MΦ对肿瘤细胞的杀伤活性.将重组质粒注射到荷瘤小鼠腹腔,观察小鼠腹水出现时间和存活时间.结果:将小鼠基因的开放阅读框(ORF)重组到真核表达载体pcDNA3.1内,测序证实和GenBank所公布序列相符.体外将IFN-γ基因导入MΦ内并表达,其培养上清对MΦ有激活作用,杀伤肿瘤细胞活性增强.腹腔内注射重组表达载体,荷瘤小鼠的腹水增长延迟、荷瘤生存时间延长.结论:构建的小鼠pcDNA3.1-IFN-γ表达载体体外转染腹腔MΦ并获表达,体内外实验显示有抗肿瘤细胞活性.
作者：赵明耀；刘康栋；董子明；赵国强；杨洪艳；黄幼田；郑智敏
来源：中国病理生理杂志 2006 年 22卷 2期
