目的:采用过氧化氢(H2O2)对人类肾脏近端小管上皮细胞系(HKC)进行氧化损伤,建立损伤的细胞模型.方法:通过检测细胞活力、培养基中的丙二醛(MDA)含量和细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性的变化研究细胞损伤的程度;利用激光共聚焦显微镜观察细胞损伤前后骨桥蛋白(OPN)表达水平的变化;采用扫描电子显微镜(SEM)观察细胞损伤前后形貌和膜表面微结构的变化.结果:用1 mmol/L H2O2作用HKC不同时间后,细胞活力和SOD活性逐渐下降,MDA释放量增加,OPN表达量显著增加并在作用时间为1 h时达到最大值;经损伤后的细胞变得干瘪收缩,且膜表面粗糙,鞭毛、突触大部分断裂脱落.结论:H2O2能够明显损伤HKC,细胞损伤后,其活力和膜表面超微结构发生变化,并在膜上表达能黏附草酸钙晶体的OPN.因此,可用1 mmol/L H2O2作用HKC 1 h建立损伤模型.
作者:彭花;邓穗平;谈金;蒋建伟;欧阳健明
来源:中国病理生理杂志 2012 年 28卷 1期