目的:初步观察Sonic Hedgehog信号通路分子Smoothened(Smo)在类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)滑膜血管内皮细胞的表达及其生物学意义.方法:收集4例病情中度活动的RA患者的滑膜组织,同时收集4例外伤或半月板损伤(无关节炎)者滑膜组织作为对照组,免疫组化检测滑膜组织Smo蛋白表达情况.采用人脐静脉内皮细胞系EA.hy926作为滑膜血管内皮细胞的模型,予不同浓度肿瘤坏死因子α(TNF-α)处理,Western blotting检测Smo蛋白表达;采用RNAi技术转染体外合成的特异性Smo-siRNA,应用Western blotting检测沉默效果;转染siRNA 24 h后,经TNF-α/放线菌素D(actinomycin D,ActD)诱导细胞凋亡,CCK-8法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡情况.结果:RA患者滑膜组织Smo表达高于对照组,以血管内皮细胞表达尤为明显.EA.hy926细胞经TNF-α刺激后,Smo蛋白表达上调(P<0.05).RNA干扰EA.hy926细胞Smo表达后,细胞存活率为(24.30±0.45)
作者：朱尚玲；彭蔚湘；罗敏琪；王明霞；林灼锋；黄建林
来源：中国病理生理杂志 2013 年 29卷 2期
