目的:探讨miR-335对人骨肉瘤MG-63细胞增殖的调控是否通过靶向抑制Sp1基因的表达实现.方法:利用萤光素酶报告基因实验验证miR-335能否靶向作用于Sp1基因的3’-非翻译区(untranslated region,UTR);利用real-time PCR和Western blotting分析Sp1 mRNA和蛋白表达的变化;通过MTT法分析MG-63细胞增殖水平.结果:萤光素酶报告基因实验结果显示,miR-335可特异性结合于Spl基因的3’-UTR.Real-time PCR和Western blotting结果显示,转染miR-335可减少Sp1蛋白的表达,但对mRNA表达无显著影响;转染Sp1表达质粒可上调Sp1 mRNA和蛋白表达.MTT结果显示,miR-335可抑制MG-63细胞增殖,转染Sp1表达质粒可部分逆转miR-335对MG-63细胞增殖的抑制作用.结论:miR-335可能通过靶向Sp1基因抑制人骨肉瘤MG-63细胞增殖.
作者：王勇；赵伟
来源：中国病理生理杂志 2013 年 29卷 8期
