目的：研究游离脂肪酸（ FFA）混合物对肝细胞L-02的脂毒性及脂代谢相关基因表达的影响。方法：正常肝细胞L-02分别用正常培养基和0．5、1、2 mmol/L FFA混合物（油酸和软脂酸的比例为2∶1）培养24 h后，尼罗红染液室温避光染色，激光共聚焦显微镜及流式细胞仪确定细胞内脂质堆积情况。组织细胞酶法测定试剂盒测定细胞内甘油三酯含量。 MTT法分析细胞存活率，Annexin V-PI凋亡检测试剂盒分析肝细胞的凋亡情况，丙氨酸氨基转移酶（ ALT）和天冬氨酸氨基转移酶（ AST）测定试剂盒分别检测培养液中ALT和AST活性。实时定量PCR技术检测脂代谢相关的脂肪分化相关蛋白（ ADRP ）和固醇调节元件结合蛋白1（ SREBP-1）的mRNA表达情况。结果：各浓度FFAs混合物均可剂量依赖性增加肝细胞脂肪堆积和肝细胞甘油三酯含量，且1 mmol/L FFA混合物可增高肝细胞的甘油三酯含量2．6倍，与非酒精性脂肪肝病人的变化基本相同。2 mmol/L FFA混合物可降低肝细胞L-02细胞存活率并诱导细胞凋亡，而0．5 mmol/L和1 mmol/L FFA混合物对细胞无明显影响。与对照组相比，各浓度FFA混合物对细胞上清中ALT和AST活性无明显影响。1 mmol/L FFA混合物作用后可分别上调肝细胞的ADRP和SREBP-1 mRNA的表达2．660和2．758倍。结论： FFA混合物可
作者：王辉；陈骁；项夏霖；彭鑫；王苑芳；刘填桂；黄树林；邵红伟
来源：中国病理生理杂志 2014 年 7期
