目的:探讨雷帕霉素( rapamycin, Rapa)对小鼠星形胶质细胞体外凋亡的影响。方法:无菌分离并体外培养C57BL/6J幼鼠脑组织星形胶质细胞。通过MTT比色法测定并分析Rapa浓度对幼鼠星形胶质细胞存活的影响;SYTOX?Green荧光染色联合荧光酶标仪检测并分析Rapa对H2 O2、ionomycin、deferorxamine等诱导剂作用一定时间内细胞存活的影响;DiOC6(3)染色分析Rapa在H2 O2氧化应激损伤条件下对星形胶质细胞线粒体膜电势的影响;分别采用H2 DCFDA和MitoSOXTM Red荧光染色联合流式细胞术检测Rapa预适应对星形胶质细胞ROS生成以及线粒体内ROS含量的影响。结果:Rapa能促进H2 O2以及ionomycin联合deferorxamine损伤作用下的星形胶质细胞的存活,对线粒体膜电势有保护作用,可降低H2 O2损伤作用下星形胶质细胞ROS的产生并可以维持胞内线粒体ROS的含量在较低水平。结论:Rapa能够减少细胞内ROS的生成量并降低胞内线粒体内ROS水平;能够减轻H2 O2对细胞线粒体膜的损伤破坏,维护线粒体膜电势的稳定性,进而对氧化应激损伤介导细胞凋亡有一定的抑制作用。
作者:尹乐乐;苏运钦;黄秀艳;叶莎莎;陈真;曾耀英
来源:中国病理生理杂志 2015 年 4期