目的:探讨葛根素(puerarin,PUE)预处理对缺氧/复氧(hypoxia reoxygenation,H/R)损伤的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的保护作用.方法:HUVECs随机分为正常对照(control)组、H/R组、单纯PUE组和PUE+ H/R组(1.0×10-3 mol/L PUE预处理24h后进行H/R).采用Western blot方法检测内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白的表达,化学比色法检测组成型一氧化氮合酶(cNOS)的活性,TUNEL法检测细胞凋亡.此外,在PUE预处理前使用ERK蛋白激酶抑制剂U0126(1.0 ×10-5 moL/L)或PI3K/Akt蛋白激酶抑制剂LY294002(5.0×10-5mol/L)处理细胞lh,再进行H/R.结果:与control组相比,H/R组的eNOS蛋白表达水平降低(P<0.05),PUE预处理上调eNOS蛋白的表达水平(P<0.05),该上调作用均可被U0126及LY294002抑制(P<0.05);与control组相比,H/R组的cNOS活力下降(P<0.05),PUE预处理组的cNOS活力增加(P<0.05);与control组相比,H/R组细胞凋亡指数显著增大(P<0.01),PUE预处理组的细胞凋亡指数减小(P<0.01).结论:H/R可使HUVECs受损伤,eNOS蛋白表达及活性降低,细胞凋亡增加.PUE预处理可通过ERK1/2信号通路和PI3K/Akt信号通路上调HUVECs的eNOS蛋白表达,增强eNOS活性,减少细胞凋亡,发挥内皮细胞保护作用.
作者:黄华;丁菁;粟凤;张倩;陆德琴
来源:中国病理生理杂志 2016 年 32卷 5期