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目的::探讨缺氧诱导因子1α( HIF-1α)是否介导间歇低氧对人肺腺癌A549细胞体外活力、凋亡以及侵袭的影响。方法:采用体外转染方法将特异性针对 HIF-1α的siRNA导入A549细胞,在间歇低氧条件下培养后通过real-time PCR和Western blot法检测 HIF-1α及其下游Bcl-2、Bax、P53、P21、VEGF的mRNA和蛋白表达;通过MTT法和流式细胞术分别检测A549细胞的活力、凋亡及细胞周期;通过Transwell小室检测A549细胞的侵袭能力。结果:未转染HIF-1α-siRNA的A549细胞[间歇低氧空白对照组( IHC组)、间歇低氧空载体对照组( IHE组)及间歇低氧阴性对照组( IHN组)]经间歇低氧干预后的HIF-1α、Bcl-2及VEGF表达均明显高于常氧对照组( RA组),Bax及P21表达均明显低于RA组(P<0.05),而转染HIF-1α-siRNA的A549细胞[间歇低氧siRNA组(IHS组)]较IHC组、IHE组及IHN组经间歇低氧干预后的HIF-1α、BCL-2及VEGF表达均明显下调,Bax及P21表达较均明显上调(P<0.05);所有间歇低氧组A549细胞的P53表达均较RA组升高(P<0.05),但各间歇低氧组之间无显著性差异。 IHC组、IHE组及IHN组A549细胞经间歇低氧干预后较RA组的细胞活力增强,凋亡率下降,侵袭力增强(P<0.05),而IHS组A549细胞经间歇低氧干预后细胞周期被阻滞于G1期,较未转染组的细胞活

作者:杨士芳;李晓明;安弘;高兴林

来源:中国病理生理杂志 2016 年 32卷 11期

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作者:
杨士芳;李晓明;安弘;高兴林
来源:
中国病理生理杂志 2016 年 32卷 11期
标签:
间歇低氧 缺氧诱导因子1α RNA干扰 A549细胞 Intermittent hypoxia Hypoxia-inducible factor 1α RNA interference A549 cells
目的::探讨缺氧诱导因子1α( HIF-1α)是否介导间歇低氧对人肺腺癌A549细胞体外活力、凋亡以及侵袭的影响。方法:采用体外转染方法将特异性针对 HIF-1α的siRNA导入A549细胞,在间歇低氧条件下培养后通过real-time PCR和Western blot法检测 HIF-1α及其下游Bcl-2、Bax、P53、P21、VEGF的mRNA和蛋白表达;通过MTT法和流式细胞术分别检测A549细胞的活力、凋亡及细胞周期;通过Transwell小室检测A549细胞的侵袭能力。结果:未转染HIF-1α-siRNA的A549细胞[间歇低氧空白对照组( IHC组)、间歇低氧空载体对照组( IHE组)及间歇低氧阴性对照组( IHN组)]经间歇低氧干预后的HIF-1α、Bcl-2及VEGF表达均明显高于常氧对照组( RA组),Bax及P21表达均明显低于RA组(P<0.05),而转染HIF-1α-siRNA的A549细胞[间歇低氧siRNA组(IHS组)]较IHC组、IHE组及IHN组经间歇低氧干预后的HIF-1α、BCL-2及VEGF表达均明显下调,Bax及P21表达较均明显上调(P<0.05);所有间歇低氧组A549细胞的P53表达均较RA组升高(P<0.05),但各间歇低氧组之间无显著性差异。 IHC组、IHE组及IHN组A549细胞经间歇低氧干预后较RA组的细胞活力增强,凋亡率下降,侵袭力增强(P<0.05),而IHS组A549细胞经间歇低氧干预后细胞周期被阻滞于G1期,较未转染组的细胞活