目的 探讨沉默缺氧诱导因子1α(HIF-1α)对缺氧状态肾小管上皮细胞增殖、凋亡和坏死的影响.方法 利用氯化钴模拟缺氧状态,并应用小分子RNA干扰(siRNA)技术沉默HIF-1α基因表达.将细胞分成5组,分别是正常培养组、缺氧培养组、转染试剂组、阴性对照组和HIF-1α siRNA组.用MTY试验检测细胞的生长抑制率;用TUNEL法、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(aspase)-3蛋白定量法检测细胞的凋亡率;检测细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活力来测定细胞的坏死情况;用实时定量PCR法和Western印迹法检测细胞HIF-1α、HIF-2α、葡萄糖转运蛋白1(Glut-1)、血管内皮生长因子(VEGF)mRNA和蛋白表达水平.结果 (1)siRNA的细胞转染效率为95
作者:陈越;蒋素华;朱加明;钟一红;傅辰生;刘红;方艺;丁小强
来源:中华肾脏病杂志 2010 年 26卷 7期