目的:采用短发夹 RNA(shRNA)特异性沉默人鼻黏膜上皮细胞(HNEC)缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因,观察对其表达血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子(TGF)β1、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的影响。方法体外培养原代鼻黏膜细胞,设计合成以腺病毒为载体GFP标记的shRNA ,将HNEC分为空白对照组、阴性对照组(ad-HIF shRNA-neg )、ad-HIF shRNA干扰组。采用RT-PCR和Western blotting技术检测转染后相应因子蛋白和mRNA的表达情况。结果成功合成ad-HIF shRNA并转染入 HNEC 中。转染ad-HIF shRNA后, HIF-1α蛋白及mRNA表达分别下降40%和39%(q =31.469,16.590);同时 VEGF、TGF-β1、bFGF 的蛋白及mRNA表达也随之下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 HIF-1αmRNA的shRNA能有效地使HNEC的HIF-1α基因沉默,进而有效地抑制VEGF、TGF-β1和bFGF的表达,提示HNEC中HIF-1α可能通过直接或间接途径调控着VEGF、bFGF和TGF-β1的表达。
作者:李盈盈;周涵;张伟强;董伟达
来源:山东大学耳鼻喉眼学报 2015 年 5期