目的:探讨血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)-钙调神经磷酸酶(CaN)信号通路在乳鼠肥大心室肌细胞Nav1.5 mRNA和蛋白表达调控中的作用。方法:分离1日龄SD乳大鼠心室获心室肌细胞,分为对照( control )组、苯肾上腺素( PE)组、氯沙坦( Los)+PE组和环孢素A( CsA)+PE组;重组腺病毒shRNA干扰载体介导CaN A亚基β亚型( CnAβ)基因沉默分为腺病毒空载体( Ad-Null )组、Ad-Null +PE 组、重组腺病毒CnAβshRNA1( Ad-CnAβshRNA1)组和Ad-CnAβshRNA1+PE组。实时荧光定量逆转录PCR检测脑钠尿肽( BNP)、β-肌球蛋白重链(β-MHC)和Nav1.5的mRNA表达。 Western blot法检测全细胞提取蛋白CnAβ和Nav1.5的表达。结果:PE干预24 h明显增加心室肌细胞蛋白/DNA比值、细胞BNP和β-MHC的mRNA表达以及细胞面积;上调CnAβ蛋白表达,下调Nav1.5蛋白表达。 CsA和Los干预明显抑制PE干预的上述效应。 PE下调Nav1.5的mRNA表达,但Los和CsA不能抑制此种效应。 Ad-CnAβshRNA1沉默乳鼠心室肌细胞CnAβ基因抑制了PE对BNP mRNA的上调作用,抑制了PE对Nav1.5蛋白表达的下调作用。结论: AT1 R-CaN 信号通路参与调控培养的乳鼠肥大心室肌细胞Nav1.5蛋白表达的调控。
作者:邓娜;夏桂玲;杨龙;何炯红;李隽;田银;杨英
来源:中国病理生理杂志 2017 年 33卷 2期