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目的: 研究微小RNA-9 (microRNA-9,miR-9)对胃癌SGC-7901细胞上皮-间充质转化(EMT)功能的影响及其相关机制.方法: SGC-7901胃癌细胞株分别转染miR-9 mimics和阴性对照序列(negative control mi-mic,NCM),作为miR-9组和NCM组,并设立未转染对照(control)组,采用RT-qPCR法检测各组细胞miR-9的含量,Transwell实验检测3组细胞迁移能力和侵袭能力,Western blot法检测3组细胞的N-cadherin、E-cadherin、α-catenin和神经纤毛蛋白1(NRP1)表达水平.采用Western blot法检测NRP1过表达对miR-9抑制EMT的拮抗作用.双萤光素酶实验检测miR-9与NRP1的关系.结果: miR-9组的miR-9 表达水平明显上调,为control组的538倍(P<0.05).miR-9组的迁移细胞数量明显低于control组(P<0.05).miR-9组的侵袭细胞数量明显低于control组(P<0.05).miR-9组细胞的N-cadherin和NRP1蛋白表达量明显降低,E-cadherin及α-catenin蛋白表达量明显升高.而NRP1及miR-9均过表达组胃癌细胞中N-cadherin蛋白表达量明显升高, E-cadherin及α-catenin蛋白表达量明显降低.双萤光素酶检验结果显示NRP1为miR-9的下游靶基因(P<0.05).结论: miR-9可能通过降低下游靶基因NRP1水平影响EMT相关蛋白表达,抑制胃癌SGC-7901细胞的EMT功能.

作者:南寿山;王珏磊

来源:中国病理生理杂志 2017 年 33卷 7期

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作者:
南寿山;王珏磊
来源:
中国病理生理杂志 2017 年 33卷 7期
标签:
胃癌 微小RNA-9 上皮-间充质转化 Gastric cancer MicroRNA-9 Epithelial-mesenchymal transition
目的: 研究微小RNA-9 (microRNA-9,miR-9)对胃癌SGC-7901细胞上皮-间充质转化(EMT)功能的影响及其相关机制.方法: SGC-7901胃癌细胞株分别转染miR-9 mimics和阴性对照序列(negative control mi-mic,NCM),作为miR-9组和NCM组,并设立未转染对照(control)组,采用RT-qPCR法检测各组细胞miR-9的含量,Transwell实验检测3组细胞迁移能力和侵袭能力,Western blot法检测3组细胞的N-cadherin、E-cadherin、α-catenin和神经纤毛蛋白1(NRP1)表达水平.采用Western blot法检测NRP1过表达对miR-9抑制EMT的拮抗作用.双萤光素酶实验检测miR-9与NRP1的关系.结果: miR-9组的miR-9 表达水平明显上调,为control组的538倍(P<0.05).miR-9组的迁移细胞数量明显低于control组(P<0.05).miR-9组的侵袭细胞数量明显低于control组(P<0.05).miR-9组细胞的N-cadherin和NRP1蛋白表达量明显降低,E-cadherin及α-catenin蛋白表达量明显升高.而NRP1及miR-9均过表达组胃癌细胞中N-cadherin蛋白表达量明显升高, E-cadherin及α-catenin蛋白表达量明显降低.双萤光素酶检验结果显示NRP1为miR-9的下游靶基因(P<0.05).结论: miR-9可能通过降低下游靶基因NRP1水平影响EMT相关蛋白表达,抑制胃癌SGC-7901细胞的EMT功能.