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目的:探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助活化因子1α(PGC-1α)基因过表达对氧糖剥夺/复氧(OGD/R)诱导的神经元线粒体功能及细胞凋亡的影响.方法:采用RT-PCR的方法从C57BL/6乳鼠大脑皮层获取PGC-1α的全基因序列,并克隆到真核表达载体pEGFP-N1上,经PCR初步鉴定后转染原代皮层神经元,Western blot鉴定PGC-1α的表达情况,成功构建PGC-1α真核表达载体pEGFP-N1-PGC-1α.分别将转染pEGFP-N1和pEGFP-N1-PGC-1α载体的皮层神经元进行OGD/R处理,分别采用MitoTracker Red染色、流式细胞术、ATP代谢检测试剂盒和TUNEL细胞凋亡检测试剂盒检测线粒体质量分数、活性氧簇(ROS)和 ATP生成、细胞凋亡以及caspase-3激活的变化.结果:PGC-1α过表达可抑制OGD/R诱导的神经元线粒体生成能力的降低和ROS的生成(P<0.05),增强ATP的合成能力(P<0.01),抑制神经元的凋亡(P<0.01)并降低caspase-3的激活(P<0.05).结论:PGC-1α过表达可通过促进线粒体生成、抑制ROS的产生和维护线粒体功能而抑制OGD/R诱导的神经元凋亡.PGC-1α可以作为开发脑缺血再灌注损伤药物的靶标之一.

作者:耿慧霞;李莺歌;石贞玉;厉永强;王来

来源:中国病理生理杂志 2017 年 33卷 11期

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作者:
耿慧霞;李莺歌;石贞玉;厉永强;王来
来源:
中国病理生理杂志 2017 年 33卷 11期
标签:
过表达 皮层神经元 氧糖剥夺/复氧 细胞凋亡 过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助活化因子1α Over-expression Cortical neurons Oxygen-glucose deprivation/reoxygenation Apoptosis Perox-isome proliferator-activated receptor γ coactivator-1α
目的:探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助活化因子1α(PGC-1α)基因过表达对氧糖剥夺/复氧(OGD/R)诱导的神经元线粒体功能及细胞凋亡的影响.方法:采用RT-PCR的方法从C57BL/6乳鼠大脑皮层获取PGC-1α的全基因序列,并克隆到真核表达载体pEGFP-N1上,经PCR初步鉴定后转染原代皮层神经元,Western blot鉴定PGC-1α的表达情况,成功构建PGC-1α真核表达载体pEGFP-N1-PGC-1α.分别将转染pEGFP-N1和pEGFP-N1-PGC-1α载体的皮层神经元进行OGD/R处理,分别采用MitoTracker Red染色、流式细胞术、ATP代谢检测试剂盒和TUNEL细胞凋亡检测试剂盒检测线粒体质量分数、活性氧簇(ROS)和 ATP生成、细胞凋亡以及caspase-3激活的变化.结果:PGC-1α过表达可抑制OGD/R诱导的神经元线粒体生成能力的降低和ROS的生成(P<0.05),增强ATP的合成能力(P<0.01),抑制神经元的凋亡(P<0.01)并降低caspase-3的激活(P<0.05).结论:PGC-1α过表达可通过促进线粒体生成、抑制ROS的产生和维护线粒体功能而抑制OGD/R诱导的神经元凋亡.PGC-1α可以作为开发脑缺血再灌注损伤药物的靶标之一.