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目的:通过观察转化生长因子β1(TGF-β1)诱导前后Akt/GSK-3β/Snail信号通路相关分子的表达情况,探讨A549/DDP细胞发生上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的分子机制.方法:TGF-β1(5 μg/L)作用48 h,观察A549/DDP细胞的形态变化,并测定EMT标志物上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)和神经型钙黏蛋白(N-cadherin)的表达情况,评估TGF-β1是否成功诱导A549/DDP细胞发生EMT.进一步将A549/DDP细胞分为TGF-β1(+) 组、TGF-β1(-) 组和LY294002组,应用Western blot法检测各组Akt/GSK-3β/Snail通路相关分子Akt、p-Akt、GSK-3β、p-GSK-3βSer9和Snail的蛋白水平.结果:形态学观察可见TGF-β1( +) 组的细胞变得更加狭长,呈纺锤形,细胞间较为疏散,形态与间充质细胞相似.与TGF-β1( -) 组比较,TGF-β1( +)组E-cadherin蛋白表达下调, N-cadherin蛋白表达上调(P<0.05);各组间 Akt 和 GSK-3β 的蛋白表达水平并无明显差别,TGF-β1( +) 组的p-Akt、p-GSK-3βSer9和Snail蛋白水平较TGF-β1( -) 组明显增强(P<0.05);PI3K抑制剂LY294002与TGF-β1同时刺激细胞后,p-Akt、p-GSK-3βSer9和Snail的蛋白水平较TGF-β1( +) 组下调(P<0.05).结论:TGF-β1干预Akt/GSK-3β/Snail信号通路,促进Akt和GSK-3β的磷酸化,提高

作者:于丹;王莹;高原;刘春英

来源:中国病理生理杂志 2018 年 34卷 6期

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作者:
于丹;王莹;高原;刘春英
来源:
中国病理生理杂志 2018 年 34卷 6期
标签:
转化生长因子β1 肺癌 上皮-间充质转化 Akt/GSK-3β/Snail信号通路 Transforming growth factor-β1 Lung cancer Epithelial-mesenchymal transition Akt/GSK-3β/Snail signaling pathway
目的:通过观察转化生长因子β1(TGF-β1)诱导前后Akt/GSK-3β/Snail信号通路相关分子的表达情况,探讨A549/DDP细胞发生上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的分子机制.方法:TGF-β1(5 μg/L)作用48 h,观察A549/DDP细胞的形态变化,并测定EMT标志物上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)和神经型钙黏蛋白(N-cadherin)的表达情况,评估TGF-β1是否成功诱导A549/DDP细胞发生EMT.进一步将A549/DDP细胞分为TGF-β1(+) 组、TGF-β1(-) 组和LY294002组,应用Western blot法检测各组Akt/GSK-3β/Snail通路相关分子Akt、p-Akt、GSK-3β、p-GSK-3βSer9和Snail的蛋白水平.结果:形态学观察可见TGF-β1( +) 组的细胞变得更加狭长,呈纺锤形,细胞间较为疏散,形态与间充质细胞相似.与TGF-β1( -) 组比较,TGF-β1( +)组E-cadherin蛋白表达下调, N-cadherin蛋白表达上调(P<0.05);各组间 Akt 和 GSK-3β 的蛋白表达水平并无明显差别,TGF-β1( +) 组的p-Akt、p-GSK-3βSer9和Snail蛋白水平较TGF-β1( -) 组明显增强(P<0.05);PI3K抑制剂LY294002与TGF-β1同时刺激细胞后,p-Akt、p-GSK-3βSer9和Snail的蛋白水平较TGF-β1( +) 组下调(P<0.05).结论:TGF-β1干预Akt/GSK-3β/Snail信号通路,促进Akt和GSK-3β的磷酸化,提高