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目的 探讨多肽Apelin对转化生长因子β(TGF-β)诱导的人肾小管上皮-间充质细胞转换(EMT)的抑制作用及其机制.方法 体外培养人近端肾小管上皮细胞,分别给予含TGF-β1(2μg/L)和/或不同浓度Apelin-13的培养基孵育细胞48 h,设立6个实验组(每组n=5):对照组、TGF-β组、TGF-β+ Apelin(10-8,10-7和10-6mol/L)组和Apelin(10-6mol/L)组.刺激结束后,用免疫荧光染色观察细胞的上皮标志物E-钙黏素(E-cadherin)、间充质标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的分布和表达.Western blot检测细胞中E-cadherin、a-SMA及Smads信号通路的主要信号分子p-Smad2/3、Smad2/3和Smad-7的蛋白表达.RT-PCR法检测细胞外基质纤维连接蛋白(FN)、I型胶原(Col-I)及细胞自身Apelin和APJ受体的mRNA表达量.结果 与对照组相比TGF-β组细胞为长梭形,E-cadherin的表达减少,α-SMA的表达增多,细胞外基质FN和Col-I的mRNA表达量也显著升高;TGF-β+ Apelin组上述效应被显著抑制,且呈浓度依赖性.与TGF-β组相比,TGF-β+ Apelin组细胞活化型Smads的水平降低(P<0.05),Smad7的表达增加(P<0.05).TGF-β组细胞自身APJ受体的表达量显著升高(P<0.05),TGF-β+ Apelin 组上述效应受到抑制,且呈浓度依赖性.结论 Apelin干扰TGF-β/Smads信号通路从而抑制肾小管

作者:王丽妍;刁宗礼;张启东;刘文虎

来源:基础医学与临床 2016 年 36卷 8期

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作者:
王丽妍;刁宗礼;张启东;刘文虎
来源:
基础医学与临床 2016 年 36卷 8期
标签:
上皮-间充质转换 Apelin 转化生长因子β 信号通路 epithelial-mesenchymal transition Apelin transforming growth factor-β signaling pathway
目的 探讨多肽Apelin对转化生长因子β(TGF-β)诱导的人肾小管上皮-间充质细胞转换(EMT)的抑制作用及其机制.方法 体外培养人近端肾小管上皮细胞,分别给予含TGF-β1(2μg/L)和/或不同浓度Apelin-13的培养基孵育细胞48 h,设立6个实验组(每组n=5):对照组、TGF-β组、TGF-β+ Apelin(10-8,10-7和10-6mol/L)组和Apelin(10-6mol/L)组.刺激结束后,用免疫荧光染色观察细胞的上皮标志物E-钙黏素(E-cadherin)、间充质标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的分布和表达.Western blot检测细胞中E-cadherin、a-SMA及Smads信号通路的主要信号分子p-Smad2/3、Smad2/3和Smad-7的蛋白表达.RT-PCR法检测细胞外基质纤维连接蛋白(FN)、I型胶原(Col-I)及细胞自身Apelin和APJ受体的mRNA表达量.结果 与对照组相比TGF-β组细胞为长梭形,E-cadherin的表达减少,α-SMA的表达增多,细胞外基质FN和Col-I的mRNA表达量也显著升高;TGF-β+ Apelin组上述效应被显著抑制,且呈浓度依赖性.与TGF-β组相比,TGF-β+ Apelin组细胞活化型Smads的水平降低(P<0.05),Smad7的表达增加(P<0.05).TGF-β组细胞自身APJ受体的表达量显著升高(P<0.05),TGF-β+ Apelin 组上述效应受到抑制,且呈浓度依赖性.结论 Apelin干扰TGF-β/Smads信号通路从而抑制肾小管