目的:研究鞘氨醇激酶1(SPK1)是否通过调节Bcl-2/Bax途径干扰小鼠Lewis肺癌(LLC)细胞的凋亡.方法:通过构建SPK1基因小干扰RNA(siRNA)真核表达载体,将siRNA转染至LLC细胞,在荧光显微镜下观察LLC细胞转染的情况.采用流式细胞术检测转染后LLC细胞的凋亡率,Western blot法检测转染后LLC细胞中SPK1、Bcl-2和Bax蛋白表达水平,ELISA法检测Bax和Bcl-2的蛋白表达.结果:转染后的LLC细胞在荧光显微镜下发出绿色荧光.siRNA-SPK1组细胞凋亡明显高于siRNA-SPK1-Neg组(P<0.01).Western blot结果显示,siRNA-SPK1组中Bax蛋白表达明显较siRNA-SPK1-Neg组高,Bcl-2蛋白表达较siRNA-SPK1-Neg组低.ELISA结果显示siRNA-SPK1组中Bax表达水平显著高于siRNA-SPK1-Neg组(P<0.01),siRNA-SPK1组中Bcl-2表达水平显著低于siRNA-SPK1-Neg组(P<0.01).结论:SPK1在LLC细胞中的表达与细胞凋亡率有关.SPK1可能是通过Bcl-2/Bax途径干扰LLC细胞凋亡.
作者：吕冰洁；赵洁；郝东；王晓芝；王涛；李洪波；杨阳
来源：中国病理生理杂志 2019 年 35卷 5期
