目的 探讨鞘氨醇激酶1(SphK1)对人骨肉瘤U2OS细胞增殖和凋亡的影响及机制.方法 将体外培养的人骨肉瘤U2OS细胞随机分为四组,转染组、Vector组分别转染SphK1 siRNA及对照siRNA,PF-543组在培养液中加入1 μmol/L SphK1特异性抑制剂PF-543,对照组常规培养.干预48 h时,采用Western blotting法检测SphK1蛋白表达,明确siRNA转染可在蛋白水平抑制骨肉瘤U2OS细胞SphK1高表达,且效果与其抑制剂PF-543相当.采用MTT法检测各组细胞存活率,采用TUNEL法和流式细胞术检测细胞凋亡率,采用Western blotting法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、Bax、Bcl-2、Caspase-3及活化的Caspase-3(cleaved Caspase-3)蛋白表达.结果 与对照组、Vector组比较,转染组、PF-543组细胞存活率均下降,细胞凋亡率均增加,PCNA、Cyclin D1、Bcl-2蛋白表达均减低,Bax、Caspase-3及cleaved Caspase-3蛋白表达均增加,组间比较P均＜0.05.结论 SphK1基因可促进骨肉瘤细胞增殖、抑制细胞凋亡,调节凋亡及增殖相关因子表达可能是其作用机制.
作者：张万贺；宝琪；杜春阳；郭义超
来源：山东医药 2017 年 57卷 48期
