目的:探讨细胞自噬对多西环素调控脂多糖(LPS)刺激巨噬细胞引发炎症反应的影响及其分子机制.方法:利用LPS刺激人单核/巨噬细胞系THP-1建立炎症反应细胞模型,用多西环素进行干预.通过测定细胞培养上清液中肿瘤坏死因子 α(TNF-α)和白细胞介素8(IL-8)等细胞因子评估炎症水平;通过Western blot法检测LC3B、核因子 κB(NF-κB)和磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)等蛋白水平评估细胞自噬水平及对炎症细胞信号通路的影响.利用3-甲基腺嘌呤(3-MA)和雷帕霉素分别抑制和促进细胞自噬,研究自噬对多西环素调控LPS刺激THP-1细胞炎症因子水平的影响.结果:LPS刺激THP-1细胞诱导细胞因子TNF-α 及IL-8快速释放,12 h左右达到峰值;多西环素有效地抑制了LPS诱导的细胞因子产生(P<0.05).多西环素增加了LPS诱导的THP-1细胞自噬水平,且多西环素本身是一种自噬诱导剂.LPS上调p-mTOR蛋白水平,而多西环素抑制p-mTOR的蛋白水平,提示多西环素通过mTOR依赖的途径而LPS通过非mTOR依赖的途径诱导自噬.进一步研究显示,联用LPS、雷帕霉素及多西环素抑制了NF-κB的蛋白水平,雷帕霉素增加了多西环素对细胞因子生成的抑制;反之,自噬抑制剂3-MA减弱了多西环素对NF-κB的抑制效应,同时减弱了多西环素对炎症因子生成的抑制效应.结论:自噬
作者：孙健；秦娥；唐吉仙；曹淼英；沈巨信
来源：中国病理生理杂志 2019 年 35卷 8期
