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[目的]观察三甲基腺嘌呤(3-MA)和雷帕霉素对染尘大鼠肺巨噬细胞自噬活动的调控以及对细胞凋亡的影响. [方法] 120只雄性Wistar大鼠均采取非暴露气管滴注的方法一次性灌注50 mg/mL SiO2粉尘进行染毒,然后随机分为3组:对照组、3-MA组和雷帕霉素组.其中后两组以1.5mg/(kg·d)和2μg/(kg·d)的剂量腹腔注射3-MA或雷帕霉素,隔日给药持续28d,3-MA组和雷帕霉素组大鼠分别在染毒7、14、28、60、90d处死,收集其肺灌洗液,离心获取肺巨噬细胞,测定其凋亡率.采用蛋白免疫印迹方法检测自噬标志性蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)及自噬调控蛋白Bediin1. [结果]雷帕霉素组大鼠染尘不同时间LC3蛋白表达均增加且比对照组高;5个观察时点大鼠肺巨噬细胞凋亡率分别为(1.74±0.73)%、(1.25±0.35)%、(1.44±1.24)%、(3.70±1.51)%、(36.98±11.91)%与对照组(5.63±1.01)%、(4.95±0.63)%、(4.10±0.43)%、(6.75±4.19)%、(30.23±11.05%)相比,除90d高于对照组低(P<0.05),其他各时期均比对照组低;3-MA组在给药期间LC3蛋白表达比对照组低,停药后蛋白表达有所增高,90d时蛋白表达水平与对照组接近;而该组肺巨噬细胞的凋亡率为(2.86±1.13)%、(8.80±0.28)%、(6.84±1.29)%、(2.54 ±1.65)%、(37.22±16.22)%,7d时凋亡

作者:时亚欣;王晓艳;陈颖;寇杰;宋瑞瑞;李清钊;沈福海;金玉兰

来源:环境与职业医学 2015 年 32卷 10期

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作者:
时亚欣;王晓艳;陈颖;寇杰;宋瑞瑞;李清钊;沈福海;金玉兰
来源:
环境与职业医学 2015 年 32卷 10期
标签:
三甲基腺嘌呤 雷帕霉素 肺巨噬细胞 自噬 凋亡 3-methyladenine rapamycin pulmonary macrophage autophagy apoptosis
[目的]观察三甲基腺嘌呤(3-MA)和雷帕霉素对染尘大鼠肺巨噬细胞自噬活动的调控以及对细胞凋亡的影响. [方法] 120只雄性Wistar大鼠均采取非暴露气管滴注的方法一次性灌注50 mg/mL SiO2粉尘进行染毒,然后随机分为3组:对照组、3-MA组和雷帕霉素组.其中后两组以1.5mg/(kg·d)和2μg/(kg·d)的剂量腹腔注射3-MA或雷帕霉素,隔日给药持续28d,3-MA组和雷帕霉素组大鼠分别在染毒7、14、28、60、90d处死,收集其肺灌洗液,离心获取肺巨噬细胞,测定其凋亡率.采用蛋白免疫印迹方法检测自噬标志性蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)及自噬调控蛋白Bediin1. [结果]雷帕霉素组大鼠染尘不同时间LC3蛋白表达均增加且比对照组高;5个观察时点大鼠肺巨噬细胞凋亡率分别为(1.74±0.73)%、(1.25±0.35)%、(1.44±1.24)%、(3.70±1.51)%、(36.98±11.91)%与对照组(5.63±1.01)%、(4.95±0.63)%、(4.10±0.43)%、(6.75±4.19)%、(30.23±11.05%)相比,除90d高于对照组低(P<0.05),其他各时期均比对照组低;3-MA组在给药期间LC3蛋白表达比对照组低,停药后蛋白表达有所增高,90d时蛋白表达水平与对照组接近;而该组肺巨噬细胞的凋亡率为(2.86±1.13)%、(8.80±0.28)%、(6.84±1.29)%、(2.54 ±1.65)%、(37.22±16.22)%,7d时凋亡