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目的:探讨自噬( autophagy)对正常培养多发性骨髓瘤( Multiple myeloma,MM)细胞株增殖的影响。方法 MM细胞株U266在正常培养条件下分别加入雷帕霉素和3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA),以正常血清培养U266细胞及淋巴瘤Jurkat细胞株为对照组;分别检测细胞的增殖及凋亡水平;单丹磺酰尸胺( monodansylcadaverine ,MDC)荧光染色法检测细胞自噬水平;逆转录PCR检测自噬相关基因mtor、Beclin1、Atg5在细胞内水平,蛋白质印迹法检测细胞内自噬相关蛋白轻链3I/Ⅱ( LC3I/Ⅱ)含量。结果 U266细胞及Jurkat细胞内均存在自噬,但前者水平高于后者。雷帕霉素可诱导MM细胞发生自噬,3-MA对自噬有双重作用。雷帕霉素及3-MA下调细胞增殖水平。雷帕霉素及3-MA处理24 h可上调正常培养条件下U266细胞凋亡水平(1.7%±0.2%,19.1%±1.0%和16.8%±0.61%)。延长培养时间至72 h,雷帕霉素处理组凋亡水平无明显变化(16.9%±0.48%)。而3-MA处理组凋亡水平下降(9.0%±0.70%)。结论 MM细胞株内会存在一定水平的自噬,并通过实验证明其高于淋巴瘤Jurkat细胞株的自噬水平。在正常培养条件下加入了雷帕霉素及3-MA可抑制MM细胞的增殖,并可诱导细胞凋亡。

作者:高灵素;虞国慧

来源:安徽医药 2015 年 4期

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作者:
高灵素;虞国慧
来源:
安徽医药 2015 年 4期
标签:
多发性骨髓瘤 雷帕霉素 3-甲基腺嘌呤 自噬 细胞凋亡 multiple myloma rapamycin 3-MA autophagy cell apoptosis
目的:探讨自噬( autophagy)对正常培养多发性骨髓瘤( Multiple myeloma,MM)细胞株增殖的影响。方法 MM细胞株U266在正常培养条件下分别加入雷帕霉素和3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA),以正常血清培养U266细胞及淋巴瘤Jurkat细胞株为对照组;分别检测细胞的增殖及凋亡水平;单丹磺酰尸胺( monodansylcadaverine ,MDC)荧光染色法检测细胞自噬水平;逆转录PCR检测自噬相关基因mtor、Beclin1、Atg5在细胞内水平,蛋白质印迹法检测细胞内自噬相关蛋白轻链3I/Ⅱ( LC3I/Ⅱ)含量。结果 U266细胞及Jurkat细胞内均存在自噬,但前者水平高于后者。雷帕霉素可诱导MM细胞发生自噬,3-MA对自噬有双重作用。雷帕霉素及3-MA下调细胞增殖水平。雷帕霉素及3-MA处理24 h可上调正常培养条件下U266细胞凋亡水平(1.7%±0.2%,19.1%±1.0%和16.8%±0.61%)。延长培养时间至72 h,雷帕霉素处理组凋亡水平无明显变化(16.9%±0.48%)。而3-MA处理组凋亡水平下降(9.0%±0.70%)。结论 MM细胞株内会存在一定水平的自噬,并通过实验证明其高于淋巴瘤Jurkat细胞株的自噬水平。在正常培养条件下加入了雷帕霉素及3-MA可抑制MM细胞的增殖,并可诱导细胞凋亡。