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目的 观察胰岛素样生长因子-1受体(IGF-1R)在大骨节病(KBD)儿童和低硒条件下T-2毒素染毒大鼠软骨组织中的表达,以及IGF-1R抑制剂对人正常软骨细胞(C28/I2细胞)凋亡的影响,探讨IGF-1R在KBD发病中的作用.方法 收集陕西省KBD病区病死儿童(5例)和非KBD病区车祸死亡及先天6指畸形手术儿童(5例)指关节,取指关节软骨经免疫组织化学法(免疫组化)检测IGF-1R表达情况.选择32只雄性SD大鼠,体质量为60~80g,按体质量采用随机数字表法分为常规饲料(硒含量101.5 μg/kg)和低硒饲料(硒含量1.1 μg/kg)组,每组16只;饲养30 d后,将常规饲料组分为对照组和T-2毒素组(100 ng·kg-1·d-1),低硒饲料组分为低硒组和低硒+ T-2毒素组,每组8只,饲养30 d后取大鼠左侧膝关节经免疫组化检测软骨组织IGF-1R表达情况.体外培养C28/I2细胞,以T-2毒素0(对照)、6、12、24μg/L及分别加亚硒酸钠(+0.1 mg/L)处理72 h;同时,以IGF-1R抑制剂0(对照)、250、500、1 000 μg/L处理48 h,采用实时荧光定量PCR (Real-time PCR)和免疫印迹法(Western Blot)检测软骨细胞IGF-1R mRNA和蛋白表达水平,采用流式细胞术检测软骨细胞凋亡情况.结果 与对照组[(100.00±0.00)%、(100.00±0.00)%]比较,KBD组儿童关节软骨表、中层IGF-1R阳性细胞表达率[(72.71±4.75

作者:王文君;冯依萍;李正正;王会;方倩;张萌;王梦莹;何颖;张迎;陈静宏

来源:中华地方病学杂志 2019 年 38卷 8期

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王文君;冯依萍;李正正;王会;方倩;张萌;王梦莹;何颖;张迎;陈静宏
来源:
中华地方病学杂志 2019 年 38卷 8期
标签:
大骨节病 胰岛素样生长因子-1受体 软骨细胞 细胞凋亡 Kaschin-Beck disease Insulin-like growth factor-1 receptor Chondrocytes Cell apoptosis
目的 观察胰岛素样生长因子-1受体(IGF-1R)在大骨节病(KBD)儿童和低硒条件下T-2毒素染毒大鼠软骨组织中的表达,以及IGF-1R抑制剂对人正常软骨细胞(C28/I2细胞)凋亡的影响,探讨IGF-1R在KBD发病中的作用.方法 收集陕西省KBD病区病死儿童(5例)和非KBD病区车祸死亡及先天6指畸形手术儿童(5例)指关节,取指关节软骨经免疫组织化学法(免疫组化)检测IGF-1R表达情况.选择32只雄性SD大鼠,体质量为60~80g,按体质量采用随机数字表法分为常规饲料(硒含量101.5 μg/kg)和低硒饲料(硒含量1.1 μg/kg)组,每组16只;饲养30 d后,将常规饲料组分为对照组和T-2毒素组(100 ng·kg-1·d-1),低硒饲料组分为低硒组和低硒+ T-2毒素组,每组8只,饲养30 d后取大鼠左侧膝关节经免疫组化检测软骨组织IGF-1R表达情况.体外培养C28/I2细胞,以T-2毒素0(对照)、6、12、24μg/L及分别加亚硒酸钠(+0.1 mg/L)处理72 h;同时,以IGF-1R抑制剂0(对照)、250、500、1 000 μg/L处理48 h,采用实时荧光定量PCR (Real-time PCR)和免疫印迹法(Western Blot)检测软骨细胞IGF-1R mRNA和蛋白表达水平,采用流式细胞术检测软骨细胞凋亡情况.结果 与对照组[(100.00±0.00)%、(100.00±0.00)%]比较,KBD组儿童关节软骨表、中层IGF-1R阳性细胞表达率[(72.71±4.75