目的 研究血管紧张素Ⅱ2型受体(AT2R)体外基因转染对小鼠骨髓源树突状细胞(BMDC)成熟活化及部分免疫功能的影响,探讨AT2R参与动脉粥样硬化斑块进展的免疫机制.方法 取C57BL/6J小鼠骨髓,经分离、纯化、分化为BMDC,先转染带有绿色荧光蛋白报告基因的AT2R基因重组腺病毒载体(pAdCMV/AT2R)或空病毒载体(pAd-GFP),再用脂多糖刺激为成熟BMDC,分PBS对照组、脂多糖组、pAd-GFP组、pAdCMV/AT2R组及pAdCMV/AT2R+ PD123319组.采用RT-PCR、免疫荧光和激光共聚焦技术方法检测BMDC中AT2R mRNA及蛋白表达;流式细胞术检测BMDC表面标志CD86和MHCⅡ的表达率;液体闪烁计数检测BMDC刺激同源T淋巴细胞增殖的能力;ELISA法检测培养基中白细胞介素12(IL-12)和γ干扰素(IFNγ)的水平.结果 pAdCMV/AT2R转染BMDC后48 ～ 72 h有AT2R mRNA表达,在激光共聚焦显微镜下胞浆及胞核有绿色荧光表达;同时在胞浆有红色荧光AT2R表达.与PBS对照组比较,pAdCMV/AT2R组和pAdCMV/AT2R+ PD123319组CD86和MHCⅡ的表达、同源T淋巴细胞增殖和细胞因子分泌量都显著升高(P＜0.01),但pAdCMV/AT2R组与脂多糖组比较显著降低(P＜0.01或P＜0.05),而pAdCMV/AT2R+ PD123319组与脂多糖组比较差异无显著性(P＞0.05).结论 体外基因转染BMDC能表达AT2R,AT2R能抑制BMDC

作者：唐兵；速晓华；陈劲松；李刚；杨大春；杨永健；朱峻；李兴科；李德

来源：中国动脉硬化杂志 2015 年 23卷 9期