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目的 探讨ghrelin对RAW264.7源性泡沫细胞迁移的影响及相关机制.方法 油红O检测泡沫细胞模型的构建,胆固醇氧化酶法检测泡沫细胞内总胆固醇(TC)、游离胆固醇(FC)和胆固醇酯(CE)含量,transwell小室实验检测ghrelin对RAW264.7源性泡沫细胞迁移的影响,Western blot检测Akt、p-Akt和cleaved Caspase-3蛋白的表达,免疫荧光检测p-Akt和cleaved Caspase-3的表达,细胞骨架荧光探针检测细胞骨架的变化.观察PI3K特异性抑制剂LY294002是否影响RAW264.7源性泡沫细胞的迁移能力及相关蛋白的表达.结果 10-7 mol/Lghrelin处理RAW264.7源性泡沫细胞可以促进泡沫细胞迁移,此过程可以被LY294002逆转.Western blot结果显示10-7 mol/L ghrelin可显著升高RAW264.7源性泡沫细胞p-Akt的表达,降低cleaved Caspase-3的表达(P<0.05),并明显改善RAW264.7源性泡沫细胞的迁移能力(P<0.05),LY294002可逆转以上变化.免疫荧光检测显示Akt在RAW264.7细胞明显表达,ghrelin组表达增多,LY294002组明显降低.结论 ghrelin可促进RAW264.7源性泡沫细胞迁移,其分子机制可能与激活PI3K/Akt信号通路有关.

作者:丁英鹏;孙玉慧;杜荣增;王中群;严金川;徐绥宁;杨洪强;朱杰;张薪茹

来源:中国动脉硬化杂志 2016 年 24卷 5期

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作者:
丁英鹏;孙玉慧;杜荣增;王中群;严金川;徐绥宁;杨洪强;朱杰;张薪茹
来源:
中国动脉硬化杂志 2016 年 24卷 5期
标签:
细胞迁移 泡沫细胞 Ghrelin PI3K/Akt信号通路 Cell Migration Foam Cells Ghrelin PI3K/Akt Signal Pathway
目的 探讨ghrelin对RAW264.7源性泡沫细胞迁移的影响及相关机制.方法 油红O检测泡沫细胞模型的构建,胆固醇氧化酶法检测泡沫细胞内总胆固醇(TC)、游离胆固醇(FC)和胆固醇酯(CE)含量,transwell小室实验检测ghrelin对RAW264.7源性泡沫细胞迁移的影响,Western blot检测Akt、p-Akt和cleaved Caspase-3蛋白的表达,免疫荧光检测p-Akt和cleaved Caspase-3的表达,细胞骨架荧光探针检测细胞骨架的变化.观察PI3K特异性抑制剂LY294002是否影响RAW264.7源性泡沫细胞的迁移能力及相关蛋白的表达.结果 10-7 mol/Lghrelin处理RAW264.7源性泡沫细胞可以促进泡沫细胞迁移,此过程可以被LY294002逆转.Western blot结果显示10-7 mol/L ghrelin可显著升高RAW264.7源性泡沫细胞p-Akt的表达,降低cleaved Caspase-3的表达(P<0.05),并明显改善RAW264.7源性泡沫细胞的迁移能力(P<0.05),LY294002可逆转以上变化.免疫荧光检测显示Akt在RAW264.7细胞明显表达,ghrelin组表达增多,LY294002组明显降低.结论 ghrelin可促进RAW264.7源性泡沫细胞迁移,其分子机制可能与激活PI3K/Akt信号通路有关.