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目的 重组表达结核分枝杆菌CFP10和ESAT 6的融合蛋白及卡介苗(BCG)CFP32,分析其抗原性.方法 用重组PCR从结核分枝杆菌标准株H37Rv基因组DNA中扩增获得融合基因cfp10-esat6;从BCG基因组DNA中扩增cfp32基因.经克隆和测序分析后,分别亚克隆至表达载体pQE-30和pET-23a(+),在大肠埃希菌BL21中表达重组蛋白,予以纯化、鉴定,Western blot和间接E1.ISA分析重组蛋白的抗原性.结果 构建了重组表达质粒pQE30-cfp10-esat6和pET-cfp32,表达了CFP10-ESAT6融合蛋白和CFP32.CFP10-ESAT6蛋白表达量约占菌体总蛋白的15.2

作者:孙文霞;谭云洪;袁仕善;谭笑;夏燕;陈婧

来源:中国防痨杂志 2010 年 32卷 6期

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作者:
孙文霞;谭云洪;袁仕善;谭笑;夏燕;陈婧
来源:
中国防痨杂志 2010 年 32卷 6期
标签:
分枝杆菌,结核 重组融合蛋白质类 细菌蛋白质类
目的 重组表达结核分枝杆菌CFP10和ESAT 6的融合蛋白及卡介苗(BCG)CFP32,分析其抗原性.方法 用重组PCR从结核分枝杆菌标准株H37Rv基因组DNA中扩增获得融合基因cfp10-esat6;从BCG基因组DNA中扩增cfp32基因.经克隆和测序分析后,分别亚克隆至表达载体pQE-30和pET-23a(+),在大肠埃希菌BL21中表达重组蛋白,予以纯化、鉴定,Western blot和间接E1.ISA分析重组蛋白的抗原性.结果 构建了重组表达质粒pQE30-cfp10-esat6和pET-cfp32,表达了CFP10-ESAT6融合蛋白和CFP32.CFP10-ESAT6蛋白表达量约占菌体总蛋白的15.2