目的制备重组培养滤液蛋白10和6000早期分泌性抗原靶的融合蛋白(rCFP10-ESAT-6),研究其免疫学特性,评价其在结核病血清学诊断中的价值.方法用基因拼接(Gene SOEing)法扩增lhp-ESAT-6融合基因、并克隆入pQE30质粒,表达、纯化rCFP10-ESAT-6蛋白,通过Western blot分析其抗原性.建立豚鼠BCG免疫模型和结核分枝杆菌强毒株(H37Rv)感染模型,建立以融合蛋白为抗原的酶联免疫吸附测定(ELISA)法,检测豚鼠血清中的抗结核分枝杆菌抗体,并与以纯化蛋白衍生物(PPD)为抗原的ELISA法比较.结果重组质粒pQE30-CFP10-ESAT-6靶基因的测序结果与预计序列(lhp-linker-ESAT-6)完全一致.融合蛋白在DH5α菌中以可溶性非包涵体形式存在,表达量占菌体总蛋白的40
作者：陈全；朱道银；骆旭东；蒋英；江山
来源：中华结核和呼吸杂志 2004 年 27卷 4期
