目的 分离培养大鼠破骨细胞,构建CKIP-1过表达慢病毒,观察被CKIP-1过表达慢病毒感染的体外大鼠破骨细胞的细胞增殖情况,探讨CKIP-1基因对体外大鼠破骨细胞增殖的影响.方法 分离、培养SD大鼠原代破骨细胞,用抗酒石酸酸性磷酸酶染色法鉴定.构建CKIP-1过表达载体,完成慢病毒包装.将破骨细胞分为A组(破骨细胞空白对照组)、B组(破骨细胞+空载病毒组)、C组(破骨细胞+CKIP-1过表达病毒组),分别进行对应处理,qRT-PCR检测CKIP-1基因表达效果,CCK-8试剂盒检验破骨细胞的相对数量.结果 成功鉴定大鼠原代破骨细胞分离培养.qRT-PCR检测破骨细胞中CKIP-1的mRNA水平结果显示:相比A组和C组,在感染CKIP-1病毒的C组,CKIP-1的基因水平有较高表达(P<0.01),CKIP-1过表达载体过表达效果明显,载体构建成功.CCK-8试剂盒检测各组细胞增殖的结果显示:相比A组和C组,感染CKIP-1病毒的C组的细胞增殖比例显著升高(P<0.01).结论 成功分离培养出大鼠破骨细胞.成功构建CKIP-1过表达慢病毒,并感染体外大鼠破骨细胞.CKIP-1的过表达具有促进体外大鼠破骨细胞增殖的功能.
作者：杨依然；刘钟；王均华；刘康；史晓林
来源：中国骨质疏松杂志 2018 年 24卷 10期
