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目的 观察高迁移率族蛋白B1 (high mobility group box-1 protein,HMGB1)对PC12神经细胞重要神经递质受体α7型乙酰胆碱受体(α7 nicotinic acetylcholine receptor,α7nAChR)表达的影响,明确HMGB1潜在的神经免疫调节功能.方法 体外培养PC12细胞,HMGB1刺激PC12细胞后,采用Western blot和RT-PCR检测HMGB1对PC12细胞α7nAChR蛋白水平和mRNA表达影响的时效-量效关系,并进一步采用流式细胞术进行验证.结果 ①与对照组相比,20 ng/mL、100 ng/mL、500 ng/mL HMGB1组α7nAChR蛋白表达水平显著上调(P<0.01),且3个时间点结果一致,其中48 h时间点500 ng/mL HMGB1组α7nAChR表达上调尤为明显;②与对照组相比,24h时间点100 ng/mL、500 ng/mL HMGB1组α7nAChRmRNA表达明显上调(P<0.01),48 h时间点500 ng/mL剂量组其表达亦显著上调(P<0.01),72 h时间点20 ng/mL、100 ng/mL、500 ng/mL剂量组α7nAChR mRNA表达水平均明显增强(P<0.01).③流式细胞结果进一步证实了HMGB1可明显上调PC12细胞α7nAChR的表达(P<0.01).结论 HMGB1以时间依赖和剂量依赖方式上调PC12细胞α7nAChR的表达,提示HMGB1可显著影响神经细胞重要功能受体的表达,α7nAChR参与了中枢对炎性细胞因子的识别和反应过程.

作者:李俊聪;董宁;祝筱梅;张庆红;姚咏明

来源:中国急救复苏与灾害医学杂志 2013 年 8卷 6期

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作者:
李俊聪;董宁;祝筱梅;张庆红;姚咏明
来源:
中国急救复苏与灾害医学杂志 2013 年 8卷 6期
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高迁移率族蛋白B1 α7型乙酰胆碱受体 PC12细胞 胆碱能抗炎通路 High mobility group box-1 protein α 7 nicotinic acetylcholine receptor PC12 cells Cholinergic anti-inflammatory pathway
目的 观察高迁移率族蛋白B1 (high mobility group box-1 protein,HMGB1)对PC12神经细胞重要神经递质受体α7型乙酰胆碱受体(α7 nicotinic acetylcholine receptor,α7nAChR)表达的影响,明确HMGB1潜在的神经免疫调节功能.方法 体外培养PC12细胞,HMGB1刺激PC12细胞后,采用Western blot和RT-PCR检测HMGB1对PC12细胞α7nAChR蛋白水平和mRNA表达影响的时效-量效关系,并进一步采用流式细胞术进行验证.结果 ①与对照组相比,20 ng/mL、100 ng/mL、500 ng/mL HMGB1组α7nAChR蛋白表达水平显著上调(P<0.01),且3个时间点结果一致,其中48 h时间点500 ng/mL HMGB1组α7nAChR表达上调尤为明显;②与对照组相比,24h时间点100 ng/mL、500 ng/mL HMGB1组α7nAChRmRNA表达明显上调(P<0.01),48 h时间点500 ng/mL剂量组其表达亦显著上调(P<0.01),72 h时间点20 ng/mL、100 ng/mL、500 ng/mL剂量组α7nAChR mRNA表达水平均明显增强(P<0.01).③流式细胞结果进一步证实了HMGB1可明显上调PC12细胞α7nAChR的表达(P<0.01).结论 HMGB1以时间依赖和剂量依赖方式上调PC12细胞α7nAChR的表达,提示HMGB1可显著影响神经细胞重要功能受体的表达,α7nAChR参与了中枢对炎性细胞因子的识别和反应过程.