目的 构建His-AMPKα1312截短缺失融合蛋白原核表达载体,表达重组AMPKα1 312为深入研究各种病理生理条件对AMPK活化的影响奠定基础.方法 经RT-PCR获得AMPKα1截短基因片段,定向插入原核表达载体PET28a(+),构建重组表达质粒YH2/PET28a(+),转化DH5αE.coli,经IPTG诱导表达及镍琼脂糖凝胶亲和层析纯化后SDS-PAGE分析及Western blot检测.结果 经测序和PCR证实重组表达质粒YH2/PET28a(+)构建正确.表达的截短缺失蛋白相对分子量约为38 kD,Westernblot分析表明,表达蛋白具有良好的抗原性.结论 已成功构建并纯化了具有生物学活性的AMPKα1312截短缺失蛋白,为深入研究AMPK奠定了基础.
作者：颜洪；张琼；吴丹；宋华培
来源：局解手术学杂志 2013 年 22卷 4期
