目的:观察全反式维甲酸(all-trans-retinoic acid,ATRA)在体外促进大鼠胚胎神经干细胞(neural stem cells,NSCs)分化为神经元过程中β连环蛋白(β-catenin)的表达情况,探讨其在NSCs分化中的意义.方法:取第3代大鼠胚胎NSCs体外培养,实验组加入1.0μmol/L ATRA诱导,分别于干预后3、5、7、9d采用免疫细胞化学染色、实时荧光定量RT-PCR、Western blot检测β-catenin的表达及变化情况,对照组不加ATRA培养,于相应时间点进行相同检测.比较两组各时间点β-catenin的表达量.结果:免疫细胞化学染色示实验组在培养3~7d时β-catenin表达逐渐增强(P<0.05),7d与9d差异无统计学意义(P>0.05),实验组各时间点与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);实时荧光定量RT-PCR检测示3~7d时β-catenin mRNA相对表达量逐渐增加(P<0.05),7d与9d差异无统计学意义(P>0.05),实验组各时间点与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);Western blot印迹检测实验组细胞内β-catenin总蛋白、胞浆内β-catenin蛋白、胞核内β-catenin蛋白3~7d时表达量逐渐增加(P<0.05),7d与9d差异无统计学意义(P>0.05).细胞内β-catenin的总蛋白变化趋势与RT-PCR结果相似,且胞浆内β-catenin和胞核内β-catenin的蛋白表达量随时间增加而增加.结论:NSCs分化为神
作者:钟德君;康敏;王高举;王清;王松
来源:中国脊柱脊髓杂志 2010 年 20卷 4期