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目的 建立稳定的基因工程细胞系.方法 将含有白细胞介素-2(IL-2)分泌肽的人endostatin全长cDNA插入真核表达载体pSNA2.0,产生重组质粒pSNA2.0/hEndostatin,利用阳离子脂质体介导将其转染到人HEK293细胞中,G418筛选后得到阳性克隆hED/293,采用Western-blot检测转染细胞上清中 endostatin蛋白的表达.结果 hED/293细胞株培养上清中有endostatin蛋白的表达,分子量为20000.结论 重组pSNA2.0/hEndostatin真核表达载体构建正确,转染HEK293细胞后可有效的表达人endostatin蛋白,并能分泌到细胞外.

作者:赵卉;潘静坤;罗芸;薛毅珑

来源:中国康复理论与实践 2007 年 13卷 5期

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作者:
赵卉;潘静坤;罗芸;薛毅珑
来源:
中国康复理论与实践 2007 年 13卷 5期
标签:
内皮抑素 真核表达载体 人胚胎肾细胞 HEK293 细胞系
目的 建立稳定的基因工程细胞系.方法 将含有白细胞介素-2(IL-2)分泌肽的人endostatin全长cDNA插入真核表达载体pSNA2.0,产生重组质粒pSNA2.0/hEndostatin,利用阳离子脂质体介导将其转染到人HEK293细胞中,G418筛选后得到阳性克隆hED/293,采用Western-blot检测转染细胞上清中 endostatin蛋白的表达.结果 hED/293细胞株培养上清中有endostatin蛋白的表达,分子量为20000.结论 重组pSNA2.0/hEndostatin真核表达载体构建正确,转染HEK293细胞后可有效的表达人endostatin蛋白,并能分泌到细胞外.