目的:通过原核表达分枝杆菌噬菌体TM4 motif3蛋白和构建结核分枝杆菌标准株 H37 Rv 休眠菌模型,检测 motif3蛋白对结核休眠菌的复苏作用。方法利用聚合酶链式反应( PCR)技术扩增噬菌体TM4 motif3基序,将PCR产物连接至表达载体pET-28a(+),重组质粒测序正确后,在大肠杆菌 BL21(DE3)中诱导表达,采用非变性方法对表达蛋白进行纯化,并将不同浓度的motif3蛋白加入结核休眠菌模型中,观察其对结核休眠菌的复苏效果及异烟肼对复苏后结核菌的杀灭作用。结果得到融合组氨酸残基的motif3重组蛋白,在12.65 ku处出现目的条带,浓度为1.1×104 pmol· L-1的motif3蛋白对结核休眠菌具有明显的复苏作用且复苏后结核菌能被异烟肼杀灭。结论噬菌体TM4 motif3蛋白对结核休眠菌具有复苏作用。
作者:张莉;江莉莎;姚义勇;柳岩;郭述良
来源:中国临床药理学杂志 2016 年 3期