目的：通过建立A20过表达肺泡巨噬细胞株，研究A20对肺泡巨噬细胞炎症反应的影响及调控机制。方法：构建携带A20基因的慢病毒载体，转染大鼠肺泡巨噬细胞（NR8383），筛选出稳定过表达A20基因的细胞株并行体外培养。向培养基中加入脂多糖（LPS ，1μg／mL）进行干预，并于刺激后0．5、1、2、4 h收集上清液及细胞。ELISA法测定上清液中细胞因子（TNF‐α、IL‐1β）及核因子κB（NF‐κB）活性。Western印迹方法检测A20蛋白及核内p65含量。实时荧光定量PCR法测定A20 mRNA含量。结果：LPS刺激后，A20过表达组（A20组）及正常对照组（VEC组）A20蛋白及mRNA含量都升高，并于1 h达高峰，之后逐渐下降；且A20组较 VEC组 A20水平明显升高（P＜0．05）。与 VEC组相比，A20组培养上清液中细胞因子（TNF‐α、IL‐1β）水平明显降低（P＜0．05）；NF‐κB DNA结合活性及核内p65含量也降低（P＜0．05）。结论：A20能够抑制肺泡巨噬细胞NF‐κB活性及TNF‐α、IL‐1β分泌，进而抑制肺泡巨噬细胞炎症反应活性。
作者：朱晓丹；王颖；毕晶；童琳；刘洁；宋元林；白春学
来源：中国临床医学 2016 年 23卷 6期
