目的 探讨血浆中细胞外组蛋白能否通过介导外周血单个核细胞(PBMC)焦亡加重急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者炎症反应.方法 选择2019年4月至9月同济大学附属上海市肺科医院收治的20例ARDS患者;选择同期进行健康体检的20例健康志愿者作为健康对照组.体内实验:采集ARDS患者确诊24 h内和健康体检者的外周血标本,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆细胞外组蛋白以及炎性因子白细胞介素(IL-1β、IL-18)和乳酸脱氢酶(LDH)水平.提取PBMC,用蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测焦亡标志分子消皮素-D N端(GSDMD-N)蛋白表达.体外实验:分离培养健康志愿者外周血PBMC并分为4组:空白对照组不给予任何处理;脂多糖(LPS)组以1 mg/L的LPS处理细胞4 h ;LPS+组蛋白组在LPS处理4 h后加入100 mg/L外源性组蛋白处理24 h ;LPS+组蛋白+肝素组在LPS和外源性组蛋白处理后的细胞中加入200 U肝素干预24 h.采用Western Blot试验检测各组细胞GSDMD-N蛋白表达;采用ELISA法检测细胞上清中IL-1β、IL-18和LDH的水平.各指标间相关性采用Spearman检验.结果 体内实验结果:与健康对照组相比, ARDS患者PBMC中GSDMD-N蛋白表达明显增加〔GSDMD-N/GAPDH :0.136(0.062,0.246)比0.026(0.018, 0.036),P＜0.01〕,血浆中IL-1β、IL-18、LDH和细胞外组蛋白

作者：金杨；孙梦；江雪梅；张卿卿；冯迪；温宗梅

来源：中华危重病急救医学 2019 年 31卷 11期