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目的 评价二十二碳六烯酸(DHA)预处理是否增强血管生成素-1(Ang-1)对氧糖剥夺(OGD)条件下大鼠脑微血管内皮细胞(BMVECs)的保护作用.方法 大鼠BMVECs传代培养,第3~4代用于实验.采用随机数字表法分为7组:正常对照组、正常对照+ Ang-1组、OGD组、OGD+ Ang-1组、OGD+DHA组、OGD+ DHA+ Ang-1组、OGD+ DHA+ GW9662+ Ang-1组.在正常对照组和正常对照+ Ang-1组加入含血清、5 mmol/L葡萄糖和1.25 mmol/L丙酮酸盐的DMEM培养液;在各OGD组用无糖、无血清的DMEM液置换原培养液.在OGD+ DHA、OGD+ DHA+ Ang-1和OGD+ DHA+ GW9662+ Ang-1组加入40 μmol/L DHA,同时在OGD+ DHA+ GW9662+ Ang-1组再加入5 μmol/L GW9662[过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)的抑制剂],以上3组在5% CO2和95%空气条件下预处理培养1h.预处理完成后,在正常对照+Ang-1组、OGD+ Ang-1组、OGD+DHA+ Ang-1组和OGD+ DHA+ GW9662+ Ang-1组加入浓度为250 ng/ml的Ang-1.除正常对照组和正常对照+ Ang-1组在5% CO2和95%空气条件下培养外,其余各组均在94% N2∶5% CO2∶1% O2低氧条件下培养,培养时间均为24h.采用流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot检测Bax、Bcl-2、半胱天冬酶-3(caspase-3)、血管生成素受体-1 (Tie-1)、Tie-2、磷酸化的Tie

作者:陈小波;夏中元;雷凡;薛锐

来源:中华临床营养杂志 2015 年 23卷 2期

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作者:
陈小波;夏中元;雷凡;薛锐
来源:
中华临床营养杂志 2015 年 23卷 2期
标签:
二十二碳六烯酸 氧糖剥夺 细胞凋亡 血管生成素-1 脑微血管内皮细胞 Docosahexaenoid acid Oxygen glucose deprivation Cell apoptosis Angiopoietin-1 Brain microvascular endothelial cells
目的 评价二十二碳六烯酸(DHA)预处理是否增强血管生成素-1(Ang-1)对氧糖剥夺(OGD)条件下大鼠脑微血管内皮细胞(BMVECs)的保护作用.方法 大鼠BMVECs传代培养,第3~4代用于实验.采用随机数字表法分为7组:正常对照组、正常对照+ Ang-1组、OGD组、OGD+ Ang-1组、OGD+DHA组、OGD+ DHA+ Ang-1组、OGD+ DHA+ GW9662+ Ang-1组.在正常对照组和正常对照+ Ang-1组加入含血清、5 mmol/L葡萄糖和1.25 mmol/L丙酮酸盐的DMEM培养液;在各OGD组用无糖、无血清的DMEM液置换原培养液.在OGD+ DHA、OGD+ DHA+ Ang-1和OGD+ DHA+ GW9662+ Ang-1组加入40 μmol/L DHA,同时在OGD+ DHA+ GW9662+ Ang-1组再加入5 μmol/L GW9662[过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)的抑制剂],以上3组在5% CO2和95%空气条件下预处理培养1h.预处理完成后,在正常对照+Ang-1组、OGD+ Ang-1组、OGD+DHA+ Ang-1组和OGD+ DHA+ GW9662+ Ang-1组加入浓度为250 ng/ml的Ang-1.除正常对照组和正常对照+ Ang-1组在5% CO2和95%空气条件下培养外,其余各组均在94% N2∶5% CO2∶1% O2低氧条件下培养,培养时间均为24h.采用流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot检测Bax、Bcl-2、半胱天冬酶-3(caspase-3)、血管生成素受体-1 (Tie-1)、Tie-2、磷酸化的Tie