目的 将已构建完成的分泌型核心蛋白聚糖(DCN)真核表达载体转染到肝癌HepG2细胞中并检测其表达,同时探讨DCN抗肿瘤作用的机制.方法 实验分为对照组细胞和转染组细胞;脂质体介导核心蛋白聚糖真核表达载体及质粒pcDNA3.1分别转染到肝癌HepG2细胞中,经G418筛选建立稳定转染的细胞株,采用RT-PCR、免疫组化和Western印迹法检测DCN表达;同时检测细胞周期、caspase-3酶活性.结果 与对照组细胞比较,转染组细胞DNC mRNA及蛋白质表达均明显增高(P<0.05);细胞生长缓慢,G0/G1期细胞显著增多,S期细胞明显降低(P<0.05);caspase-3酶活性显著增多(P<0.05).结论 成功建立了稳定转染DCN的HepG2细胞株,并证实DCN能抑制细胞生长、阻滞细胞周期、提高caspase-3酶活性.
作者:王雅丽;张玉成;吴晓冬;曹风莉;杨绍娟;张桂珍
来源:中国老年学杂志 2009 年 29卷 7期